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加内特

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
njutjhy: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-11-05 09:24:07
引用回帖:
9楼: Originally posted by njutjhy at 2012-11-02 17:05:42
我是把原来导入pet28a的一段基因的信号肽给切了的。那段基因原始在Nco1和Hind3之间的。
准备同时做两个下游的引物,一个保留组氨酸标签,一个不要his-tag的。
你提到了“在C端的组氨酸标签效果不是很好”,这个一 ...

对比N端组氨酸tag,C端的组氨酸很容易被折叠进入蛋白内部,蛋白就没法纯化了。
少壮不努力,老大徒伤悲!
11楼2012-11-04 19:33:54
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njutjhy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 加内特 at 2012-11-04 19:33:54
对比N端组氨酸tag,C端的组氨酸很容易被折叠进入蛋白内部,蛋白就没法纯化了。...

原来如此,不过看我们酶的构象,貌似N,C端都是在酶核心外面的!
冷眼看世间冷暖,笑谈人生得失
12楼2012-11-05 09:25:13
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