24小时热门版块排行榜    

查看: 2299  |  回复: 14

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

[求助] 各位加A尾后还做胶回收或者乙醇沉淀麽?还是直接连接载体.

如题,pfu PCR后72℃,taq酶加A尾,想问一下,你们加完后做不做胶回收的,还是用乙醇沉淀的,考虑到再一次回收浓度可能太低了,所以问一下各位.
回复此楼
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我以前做的时候,PCR后没有回收,做这个只是确定一下我的目的基因。不知对你有没有用,
任重道远……
2楼2012-10-26 08:50:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你是打算做什么用!不回收也可以,回收下更好!浓度低没事只要有、纯就可以!
低调稳重务实内敛---------------残
3楼2012-10-26 09:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-10-26 09:23:30
看你是打算做什么用!不回收也可以,回收下更好!浓度低没事只要有、纯就可以!

为了连接19t做TA克隆测序
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-10-26 09:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Marado: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-26 09:55:41
回收下比较好,这样你的insert比较纯,不用担心回收后浓度,只要不是低的过分了都是可以使用的。
5楼2012-10-26 09:42:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

引用回帖:
5楼: Originally posted by dshlove at 2012-10-26 09:42:28
回收下比较好,这样你的insert比较纯,不用担心回收后浓度,只要不是低的过分了都是可以使用的。

3Q,我也准备用乙醇沉淀法回收一下,胶回收损失有些高,吃不消……
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
6楼2012-10-26 09:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by Marado at 2012-10-26 09:55:26
3Q,我也准备用乙醇沉淀法回收一下,胶回收损失有些高,吃不消……...

可以,如果假阳性太多,就试试回收后连接哈。
7楼2012-10-26 10:05:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做PCR 8小管,然后点一个大孔,回收,这样浓度够你用的。
汇天下之贤
8楼2012-10-26 10:28:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu_shiyong

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Marado at 2012-10-26 09:28:42
为了连接19t做TA克隆测序...

条带单一可以直接连!
低调稳重务实内敛---------------残
9楼2012-10-26 12:48:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加A后可以直接连T载体的。如果不保险可以酒精沉淀一下
10楼2012-10-26 15:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Marado 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见