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tuming0302

新虫 (初入文坛)

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[求助] 亲和层析

请问各位大神，有没有通过亲和层析的方法来筛选结合蛋白的？我目前想通过亲和层析的方法来筛选一个小分子药物的结合蛋白，但是对于选择亲和基质以及柱子的选择还有一些不明白，所以想请各位大神指点一二。万分感谢。

[ 来自科研家族生物医药家族 ]

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1楼 2012-10-25 19:38:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-27 15:47:25

引用回帖:

7楼: Originally posted by tuming0302 at 2012-10-26 13:38:49
谢谢你。这个树脂主要是作为固相载体来偶联药物，然后筛选药物结合蛋白。目前考虑的是药物的特性对偶联及结合蛋白的筛选的影响。不知道你做没做过连续亲和层析，就是不同于传统的竞争方法。谢谢。...

你的是固相载体，你担心的是药物特性对结合后蛋白分离的影响。
我不清楚你的药物，一般无亲和力或非特异吸附的物质则被起始缓冲液洗涤出来，并形成了第一个层析峰；然后，恰当地改变起始缓冲液的pH值、或增加离子强度、或加入抑制剂等因子，即可把物质S从固相载体上解离下来，并形成了第二个层析峰，但是条件还是要靠你自己去试。
希望有帮助。