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zkyysmzl2lwj金虫 (正式写手)
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[求助]
p-erk做western时显影后没条带
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做P-ERK 的western，用丽春红染色有五条带，显影时只有其中2条带， 上样量80ug 电泳下胶恒压120V 转膜恒流300mA 电压：80-110V波动，转膜时间50min 封闭：5%BSA 1抗：过夜 CST1:1000 3%BSA（用回收的1抗敷动物组织，western可以做出来） 洗1抗：10min*3次 2抗：常温下2h CST赠品 1:1000 3%BSA 洗2抗：6min*5次 显影：ECL 要6分钟以上才出来，而且很不清晰 内参GAPDH只要40秒就出来了 求助~  P-ERK-2-9MIN.jpg |
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2楼2012-10-29 15:13:30
zkyysmzl2lwj
金虫 (正式写手)
- 应助: 7 (幼儿园)
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- 散金: 29
- 红花: 1
- 帖子: 758
- 在线: 100.5小时
- 虫号: 1898590
- 注册: 2012-07-18
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
3楼2012-10-29 15:29:02