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[求助]
请教各位前辈关于EMSA（gel shift）的问题！ 已有1人参与
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我没做过蛋白实验，理论知识也懂的少，书上面的东西自己不敢确定是不是理解的对。所以想各位前辈求教！我准备做EMSA实验，验证C/EBPβ跟我做的基因启动子核心区域的结合。超标达我做了，结果很好。所遇到的问题如下:1.我看有promega的gel shift试剂盒和thermo的EMSA试剂盒，前者便宜一半，但是不知道哪个跟好些？ 2.我用在线软件TFsearch在我验证的核心启动子去找到2个C/EBPβ。但是预测的结果显示，2个C/EBPβ 的结合位点的序列不同，这样的话，我合成探针是不是要合成2个，还是合成一个但包含2个2个C/EBPβ不同的结合序列？是不是探针一定要p32标记？标两端吗？ 3.我是做猪的基因，抗体的话猪的很少！C/EBPβ只在santa cruz 这家找到一个可以在猪上用的。不知道怎么才能验证这个抗体是否符合要求？ 希望各位能为小弟解答迷津！在此谢过！ |
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2楼2012-10-24 08:25:06
weigh1111
铁杆木虫 (正式写手)
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