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daiybe

金虫 (小有名气)

daiybe

MicEPI: 4
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
杯子然: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-24 21:46:48
rainwander: MicEPI+1, 鼓励交流 2012-10-24 21:49:21

引用回帖:

6楼: Originally posted by 杯子然 at 2012-10-23 19:39:24
请问前辈，标准曲线制作时，称取0.1g木糖，稀释定容到100ml，分别称取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5(ml)木糖标准溶液于10ml玻璃管中，用蒸馏水补齐2ml，再加入2mlDNS试剂，沸水5min，然后冷却，加蒸馏水定容至10ml。 ...

由你的数据可以看出，你配置的木糖浓度是1mg/ml,做标准曲线时，你加0.2ml木糖溶液，然后你又加了2mlDNS，最后定容到10ml，那么，我要告诉你的是：你这10ml的体系里边总共含有0.2mg木糖，而这个对应的吸光度值是0.213，但是你测酶活时候读出的反应管中的OD也是0.213，那个可以确定的是，你这支反应管中总的木糖含量也就是2mg。但这2mg木糖来源于两个地方，一个是底物里边含有的（微量），另一个是被酶降解下来的木糖，这里并不存在你说的稀释这一说法，因为，测酶活的过程中，一般标准曲线使用怎样的体系，那么测定过程也用同样的体系。比如你的测法应该是1.8ml底物+0.2ml酶液+2mlDNS+6ml水，最后总体积为10ml，而我们平时用的是1.8ml底物溶液+0.2ml酶液+3mlDNS+10ml水，总体积为15ml，很简单，如有不明，欢迎发邮件详询lrh072006@126.com