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daiybe

金虫 (小有名气)

daiybe

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
杯子然: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-24 21:46:48
rainwander: MicEPI+1, 鼓励交流 2012-10-24 21:49:21
引用回帖:
6楼: Originally posted by 杯子然 at 2012-10-23 19:39:24
请问前辈,标准曲线制作时,称取0.1g木糖,稀释定容到100ml,分别称取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5(ml)木糖标准溶液于10ml玻璃管中,用蒸馏水补齐2ml,再加入2mlDNS试剂,沸水5min,然后冷却,加蒸馏水定容至10ml。 ...

由你的数据可以看出,你配置的木糖浓度是1mg/ml,做标准曲线时,你加0.2ml木糖溶液,然后你又加了2mlDNS,最后定容到10ml,那么,我要告诉你的是:你这10ml的体系里边总共含有0.2mg木糖,而这个对应的吸光度值是0.213,但是你测酶活时候读出的反应管中的OD也是0.213,那个可以确定的是,你这支反应管中总的木糖含量也就是2mg。但这2mg木糖来源于两个地方,一个是底物里边含有的(微量),另一个是被酶降解下来的木糖,这里并不存在你说的稀释这一说法,因为,测酶活的过程中,一般标准曲线使用怎样的体系,那么测定过程也用同样的体系。比如你的测法应该是1.8ml底物+0.2ml酶液+2mlDNS+6ml水,最后总体积为10ml,而我们平时用的是1.8ml底物溶液+0.2ml酶液+3mlDNS+10ml水,总体积为15ml,很简单,如有不明,欢迎发邮件详询lrh072006@126.com
爱一个人,比恨一个人难的太多了
7楼2012-10-24 20:32:20
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