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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌株复苏失败是怎么回事？
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-21 23:29:53
我做菌种保藏甘油的浓度是15%。说是抑制，多数情况下也可以长，就是长得不好，不好用。所以总是先划下板再摇。多一个晚上在板上复苏一下也没什么大不了的吧。...

那感受态呢？才冻存了几天就复苏不了，是不是感受态有问题？
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你的日子如何，你的力量也必如何！
11楼2012-10-22 16:36:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sxxuan: 金币+2, ★有帮助 2012-10-27 21:57:38
scelab: 金币+3, 谢谢热心交流~ :) 2012-10-28 09:07:58
引用回帖:
11楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-22 16:36:32
那感受态呢？才冻存了几天就复苏不了，是不是感受态有问题？...

感受态一般是直接加几微升在LB摇菌的，而且做的感受态细胞也不含甘油啊。感受态细胞不能反复冻化，处理好后直接分装成100ul/管，液氮冻了存放在-80°C。如果没有反复冻化，可能是细胞没做好。
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12楼2012-10-23 07:59:03
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-23 07:59:03
感受态一般是直接加几微升在LB摇菌的，而且做的感受态细胞也不含甘油啊。感受态细胞不能反复冻化，处理好后直接分装成100ul/管，液氮冻了存放在-80°C。如果没有反复冻化，可能是细胞没做好。...

感受态不是加甘油之后才放在-80冻的吗？没有反复冻化感受态，一般都是用的时候再从-80拿出来放在冰上融解的。
就是说如果后面菌株出问题了，也有可能是感受态没有做好的缘故？
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你的日子如何，你的力量也必如何！
13楼2012-10-27 21:57:25
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab: 金币+2, 谢谢热心交流~ :) 2012-10-28 09:08:09
引用回帖:
13楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-27 21:57:25
感受态不是加甘油之后才放在-80冻的吗？没有反复冻化感受态，一般都是用的时候再从-80拿出来放在冰上融解的。
就是说如果后面菌株出问题了，也有可能是感受态没有做好的缘故？...

我做感受态都是处理好了直接冻存的。用的时候在冰上化了做转化。如果说你觉得感受态不行了，可以把空对照稀释后涂一个不加抗生素的LB板，应该长很多菌的。
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14楼2012-10-28 02:59:47
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-28 02:59:47
我做感受态都是处理好了直接冻存的。用的时候在冰上化了做转化。如果说你觉得感受态不行了，可以把空对照稀释后涂一个不加抗生素的LB板，应该长很多菌的。...

好的，谢谢，确实是可以试试这个方法
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你的日子如何，你的力量也必如何！
15楼2012-10-30 11:46:35
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