应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助-4Kb的基因P不出来
54/1返回列表
查看: 2139  |  回复: 37
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

昺昺

木虫 (小有名气)

[求助] 求助-4Kb的基因P不出来

有一个4Kb的基因，我需要把它P出来然后够载体，用cDNA二链为模板，混合酶、rTaq、LA Taq、pfu等酶都试过了，退火温度也做过梯度，还有，分成两段进行拼接的方法也用过，都是P不出来。请各位大虾指点一二，不甚感激！！

[ Last edited by 1949stone on 2012-10-23 at 07:50 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
太阳出来，星星要走。
1楼 2012-10-18 09:38:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 植物园园长 at 2012-10-18 16:15:57
天根最近出来一款快速的高保真酶Fast HiFi酶，扩增能力超强，建议试试。

你好！我是用了一下天根的高保真酶，也是不好，请问你们当时是怎么调整程序的啊
赞一下 回复此楼
太阳出来，星星要走。
34楼2012-11-01 16:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 38 个回答

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果基因片段过大的话，建议分成几段P，然后拼接！
赞一下 回复此楼
持之以恒、永不放弃！
2楼2012-10-18 10:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hj890509

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
昺昺: 金币+3, ★有帮助 2012-10-18 10:55:04
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-18 18:53:37
我们实验室也做一个基因大概4.7kb，刚开始P不出来，后来分成了四段分别P出来后拼接，现在已经做成功了，多试试
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-18 10:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昺昺

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hj890509 at 2012-10-18 10:45:26
我们实验室也做一个基因大概4.7kb，刚开始P不出来，后来分成了四段分别P出来后拼接，现在已经做成功了，多试试

谢谢指点！那我分成三段也试过，还有，你在做拼接过程中，那些需要特别注意的，比如引物、PCR程序、扩增长度啊等等，我拼接的时候有两段都是1Kb左右，也是照样P不出来
赞一下 回复此楼
太阳出来，星星要走。
4楼2012-10-18 10:57:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 38 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线，员工过不下去啦 +3 qut2026 2026-04-09 7/350 2026-04-11 21:55 by doublecle
[考研] 求助调剂，跨调 +10 X十甫寸Y 2026-04-11 10/500 2026-04-11 21:26 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 332求调剂 +13 蕉蕉123 2026-04-10 13/650 2026-04-11 14:23 by zxhbx
[考研] 291求调剂 +8 关忆北. 2026-04-09 9/450 2026-04-11 11:57 by zhq0425
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 电气专硕320求调剂 +4 小麻子111 2026-04-10 4/200 2026-04-11 10:16 by Delta2012
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 311求调剂 +13 xyp想读书 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:41 by 猪会飞
[考研] 化学工程与技术324调剂 +23 孙常华 2026-04-09 25/1250 2026-04-11 00:07 by 骑牛渡寒江
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 计算机类求调剂，22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 336材料与化工085600求调剂 +21 水星记infp 2026-04-05 24/1200 2026-04-10 15:28 by luoyongfeng
[考研] 本科郑州大学，一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭