版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4238)
>基金申请 (262)
>虫友互识 (179)
>文献求助 (178)
>导师招生 (116)
>考博 (90)
>硕博家园 (82)
>论文投稿 (55)
>找工作 (50)
>考研 (49)
>论文道贺祈福 (42)
>教师之家 (39)
>公派出国 (39)
>博后之家 (37)
>招聘信息布告栏 (29)
>休闲灌水 (26)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lxh502976898

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 640.6
红花: 1
帖子: 89
在线: 84.7小时
虫号: 1140069
注册: 2010-11-06
性别: GG
专业: 药理学其他科学问题

[求助] 蛋白诱导表达

我最近构建了表达载体，酶切鉴定也合格，加IPTG诱导后没有又到处目的蛋白条带，急需帮助。。。。。

回复此楼

» 猜你喜欢

Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有140人回复
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复
氢氧化钾活化操作已经有18人回复
散金已经有68人回复
生物质超级电容器已经有0人回复

1楼 2012-10-17 11:22:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

引用回帖:

9楼: Originally posted by lxh502976898 at 2012-10-19 15:50:04
原核表达载体pet30a 菌体和上清都没有特异性条带目的蛋白如果有信号肽会出现什么情况我从全基因合成到载体构建都是送到外面生化公司做的只是回来做个酶切鉴定然后诱导表达和纯化以及后续活性实验...

序列前有信号肽会分泌。公司给你做的克隆是否测序？会不会是有移码或者中间有终止密码子？

赞一下

回复此楼

12楼2012-10-20 06:33:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 17 个回答

yongbo_liang

新虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 43 (小学生)
金币: 266.2
散金: 10
帖子: 114
在线: 52.5小时
虫号: 2009557
注册: 2012-09-18
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你换个载体或是表达菌株尝试一下。
应该是两者不相容

赞一下

回复此楼

2楼2012-10-17 11:26:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xiayongxiu

金虫 (正式写手)

应助: 11 (小学生)
金币: 700.5
帖子: 369
在线: 136.5小时
虫号: 1052825
注册: 2010-07-06
专业: 果树学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-17 14:51:08

首先，确认你的表达载体的启动子，看是否是通过IPTG诱导的；其次是筛选诱导培养的条件，包括IPTG的量、诱导温度、转速等等；还有就是诱导蛋白纯化过程了，有的蛋白是以包涵体的形式存在，所以还得注意了。

赞一下

回复此楼

一切都要靠自己努力

3楼2012-10-17 11:31:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lxh502976898

金虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 640.6
红花: 1
帖子: 89
在线: 84.7小时
虫号: 1140069
注册: 2010-11-06
性别: GG
专业: 药理学其他科学问题

引用回帖:

3楼: Originally posted by xiayongxiu at 2012-10-17 11:31:37
首先，确认你的表达载体的启动子，看是否是通过IPTG诱导的；其次是筛选诱导培养的条件，包括IPTG的量、诱导温度、转速等等；还有就是诱导蛋白纯化过程了，有的蛋白是以包涵体的形式存在，所以还得注意了。

能确定是IPTG诱导，我是打算先诱导一下，确定能否能表达之后再优化条件，

赞一下

回复此楼

4楼2012-10-17 15:31:20

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 17 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4	gy1nBQXYQJqL 2026-08-29	6/300	2026-08-30 17:47 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	10/500	2026-08-30 17:36 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	9/450	2026-08-30 17:34 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	14/700	2026-08-30 17:01 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 能否申诉？ +4	echo8914667 2026-08-30	4/200	2026-08-30 16:03 by sundiv
[考博] 找导师 +6	yuanjiabao 2026-08-29	7/350	2026-08-30 14:40 by 生科新手
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	9/450	2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3	笨笨唐 2026-08-28	3/150	2026-08-30 09:29 by cww8181
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4	gy1nBQXYQJqL 2026-08-29	5/250	2026-08-30 06:55 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15	晴天加油 2026-08-26	16/800	2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4	tannykie 2026-08-29	4/200	2026-08-29 17:14 by lmz0216
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9	苏东坡二世 2026-08-23	9/450	2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12	Kittylucky 2026-08-27	13/650	2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11	董八千 2026-08-26	11/550	2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4	winsaint 2026-08-27	9/450	2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5	ssyjh 2026-08-27	5/250	2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 我不理解！ +15	Edward_pc 2026-08-26	23/1150	2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9	trojank 2026-08-26	9/450	2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7	一怀馨秋 2026-08-26	7/350	2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8	beefly 2026-08-26	8/400	2026-08-26 08:37 by xuzhipiao