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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 制备型高效液相色谱
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红虫梦

新虫 (初入文坛)

[求助] 制备型高效液相色谱

各位同仁：
  使用制备型的高效液相色谱（C4，250*20mm)纯化毫克级别的蛋白质，其检测器能否检测出来？最近做的时候总是没有峰，是不是蛋白量太少，还是在这个级别上紫外检测不出来？
  谢谢！
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梦想
1楼2012-10-16 10:10:54
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红虫梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by henan116 at 2012-10-16 10:44:42
所谓制备，原理和分析型是一样的；若同样条件下分析功能时能检测到，制备功能时也能检测到的。
另外，含量少  也不至于不出峰吧，毫克级别啦。

分析型能检测到，进样20ul，最大吸收峰为50mA。换成制备型以后，柱子变大了，所以我就觉得是不是有可能检测不到。
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梦想
3楼2012-10-17 09:13:58
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henan116

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-16 13:49:48
所谓制备，原理和分析型是一样的；若同样条件下分析功能时能检测到，制备功能时也能检测到的。
另外，含量少  也不至于不出峰吧，毫克级别啦。
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2楼2012-10-16 10:44:42
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henan116

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-18 18:43:13
同样的液相条件吗，如流动相、柱子填料、尺寸？
多跑一段时间看看，按理说不会检测不到的，
再或者把样品的浓度提高一下试试。
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4楼2012-10-18 10:05:22
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红虫梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by henan116 at 2012-10-18 10:05:22
同样的液相条件吗，如流动相、柱子填料、尺寸？
多跑一段时间看看，按理说不会检测不到的，
再或者把样品的浓度提高一下试试。

柱子的尺寸不一样，分析型的（250*4mm),制备型是大了好多，所以我就担心制备型的柱子大，从而检测不到蛋白。
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梦想
5楼2012-10-19 09:42:45
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