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红虫梦

新虫 (初入文坛)

[求助] 制备型高效液相色谱

各位同仁:
  使用制备型的高效液相色谱(C4,250*20mm)纯化毫克级别的蛋白质,其检测器能否检测出来?最近做的时候总是没有峰,是不是蛋白量太少,还是在这个级别上紫外检测不出来?
  谢谢!
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梦想
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红虫梦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by henan116 at 2012-10-16 10:44:42
所谓制备,原理和分析型是一样的;若同样条件下分析功能时能检测到,制备功能时也能检测到的。
另外,含量少  也不至于不出峰吧,毫克级别啦。

分析型能检测到,进样20ul,最大吸收峰为50mA。换成制备型以后,柱子变大了,所以我就觉得是不是有可能检测不到。
梦想
3楼2012-10-17 09:13:58
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henan116

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-16 13:49:48
所谓制备,原理和分析型是一样的;若同样条件下分析功能时能检测到,制备功能时也能检测到的。
另外,含量少  也不至于不出峰吧,毫克级别啦。
2楼2012-10-16 10:44:42
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henan116

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-18 18:43:13
同样的液相条件吗,如流动相、柱子填料、尺寸?
多跑一段时间看看,按理说不会检测不到的,
再或者把样品的浓度提高一下试试。
4楼2012-10-18 10:05:22
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红虫梦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by henan116 at 2012-10-18 10:05:22
同样的液相条件吗,如流动相、柱子填料、尺寸?
多跑一段时间看看,按理说不会检测不到的,
再或者把样品的浓度提高一下试试。

柱子的尺寸不一样,分析型的(250*4mm),制备型是大了好多,所以我就担心制备型的柱子大,从而检测不到蛋白。
梦想
5楼2012-10-19 09:42:45
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