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点点tina金虫 (小有名气)
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硫酸苯酚法测定多糖含量中量的问题
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| 我做的标准曲线是比较好的,R2在0.99以上。我做多糖的提取之后算出来的多糖的含量极其少,在0.14mg/ml以下,可是它应该的范围是在4mg/ml左右,我想知道是否是硫酸苯酚法的问题呢?还是怎样呢? |
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xiaozhe026
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karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论! 2013-07-20 15:18:59
karl2100: 金币+1, 谢谢参与讨论! 2013-07-20 15:18:59
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请问一下,这个含量计算方法是怎样的呢?个人有点不太懂。先用葡萄糖作出标曲,以木瓜多样为例:精确称取野木瓜粉末0.2g,用80%乙醉浸泡过夜,索氏抽提器中用80%乙醉回流3h,以去除单搪、低聚糖、普类及生物碱等成分。残渣挥干乙醇后用蒸馏水抽提2h,反复洗至250ml容量瓶中,定容成样品液。吸取样品液0.5ml,按上述标准曲线操作步骤,测吸光度,按标准曲线和下式计算样品中多糖的百分含量。多糖含量(%)=CxDxF/W。式中,C为样品液中葡萄糖的浓度;D为样品液的稀释因素:F为换算因子;W为样品的重量。换算因子的测定,精确称取干操至恒重的精制野木瓜多糖(脱脂、去淀粉、去蛋白后乙醇沉淀的糖)4mg,置于50ml容量瓶中,加水溶解至刻度。吸取上述溶液1.0ml,测定吸光度,求出此精制多糖中葡萄糖的浓度,按下式计算出换算因子F,F=w/(cxD)。式 中,w为多糖重量(mg);C为精制多糖中葡萄糖的浓度(ug/ml),D为多糖的稀释因素。 以上是文献中测定的方法。我做的是麦麸中的阿拉伯木聚糖,提出的阿拉伯木聚糖已经过脱脂、去淀粉、去蛋白处理,然后乙醇沉淀的。现在我想测提取物中的总糖含量,用苯酚-硫酸法,那我要怎么计算换算因子呢?我提取的糖不就相当于精致多糖了吗?说的有点啰嗦哈~ |
14楼2013-07-20 14:39:59
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2楼2012-10-16 10:25:48
点点tina
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3楼2012-10-16 12:26:24
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4楼2012-10-16 13:54:35













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