| 查看: 502 | 回复: 2 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
大虾帮忙
|
||
|
我构建载体：目的片断1800bp左右连接PMD-19载体回收提质粒， 载体psilent-1 6700bp,用ApaI 和XhoI 分别分步酶切，回收效果还可以，然后连接 T4连接酶 16度 过夜，然后转化大肠杆菌，然后菌落PCR鉴定阳性克隆，菌落PCR跑出来的大小和目的片断一样1800 左右，然后就提取质粒，可是 这个质粒提出来跑电泳却只有2500左右，怎么会那么小？，于是 今天我用ApaI切，出来了一条明亮的条带，也只有5000Bp,不知怎么 回事？ 我那个 应该是1800+6000多 = 起码都有8000撒，囊个会这样子也 ，哪位高手 帮帮我 看问题出在哪里! 明天准备再切一次，两个酶 分步酶切 看能切成我要的大小不 |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有56人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
loveqiuqiu
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 135.3
- 红花: 1
- 帖子: 69
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 3592338
- 注册: 2014-12-13
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传学
3楼2015-03-26 21:02:50
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2012-10-12 07:25:36
