| 查看: 576 | 回复: 2 | ||
[求助]
大虾帮忙
|
|
我构建载体：目的片断1800bp左右连接PMD-19载体回收提质粒， 载体psilent-1 6700bp,用ApaI 和XhoI 分别分步酶切，回收效果还可以，然后连接 T4连接酶 16度 过夜，然后转化大肠杆菌，然后菌落PCR鉴定阳性克隆，菌落PCR跑出来的大小和目的片断一样1800 左右，然后就提取质粒，可是 这个质粒提出来跑电泳却只有2500左右，怎么会那么小？，于是 今天我用ApaI切，出来了一条明亮的条带，也只有5000Bp,不知怎么 回事？ 我那个 应该是1800+6000多 = 起码都有8000撒，囊个会这样子也 ，哪位高手 帮帮我 看问题出在哪里! 明天准备再切一次，两个酶 分步酶切 看能切成我要的大小不 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有225人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
2楼2012-10-12 07:25:36
loveqiuqiu
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 135.3
- 红花: 1
- 帖子: 69
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 3592338
- 注册: 2014-12-13
- 性别: MM
- 专业: 微生物遗传学
3楼2015-03-26 21:02:50
