24小时热门版块排行榜    

查看: 7423  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rong51

金虫 (小有名气)

半边月

[求助] PCR产物电泳,条带弥散的原因

最近提的DNA,PCR后跑电泳,条带总是弥散,不知道什么原因,求高手指教。

Administrator 2012-10-09 2.jpg
回复此楼
身无彩凤双飞翼,心有灵犀一点通
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyz_su

新虫 (小有名气)

送红花一朵
你好,我也遇到了PCR后跑胶弥散的情况,大半个月了。没有找到什么问题。请问你的引物是什么问题?求帮助,万分感谢啊
17楼2018-04-15 17:21:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rong51: 金币+2, 有帮助 2012-10-09 11:03:51
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-09 15:50:20
如下方法都可以提高特异性,
1, 降低模板量
2,提高退火温度
3,降低镁离子浓度,
4,加入适量二甲基亚砜
5,适当降低引物浓度
2楼2012-10-09 11:01:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
rong51: 金币+2, 有帮助 2012-10-09 11:11:21
个人觉得你的模板浓度可能偏高或者质量不高是主要原因
3楼2012-10-09 11:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rong51

金虫 (小有名气)

半边月

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenguestc at 2012-10-09 11:01:57
如下方法都可以提高特异性,
1, 降低模板量
2,提高退火温度
3,降低镁离子浓度,
4,加入适量二甲基亚砜
5,适当降低引物浓度

同样的模板量,镁离子浓度,引物浓度,同样的PCR程序,以前做得挺好的。这两次提的DNA,不知道为什么带就是不清晰,DNA浓度检测很高,纯度也很好。
身无彩凤双飞翼,心有灵犀一点通
4楼2012-10-09 11:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 19:55 by lXgU0RvNTDC9
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 19:34 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 8/400 2026-08-23 18:58 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 18:46 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见