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seq.cn

铜虫 (初入文坛)

[交流] 文库构建质控 已有1人参与

从信息分析角度,来检测文库构建,或者样品的好坏也是有一些方法的,这里只以转录组为例(BY seq.cn):
1. 比回reference的比率。
如果原始样品有其他物种样品污染,则比回率会低于正常水平(~80%)。如果有污染,需要重新准备样品。
2. insert size大小分布
如果切胶正常,insert size和预期的分布应该一致,如果不一致,则可能是切胶不均匀导致。如果insert size过短,会造成PE测序大部分都overlap,虽然数据还可以继续使用,但是造成很多浪费。
3. reads测序质量分布
每个位点的质量分布,这个是测序的影响。如果质量过低,需要重测。
4. 用来计算表达量的reads总数。
对于mRNA测序,如果有小RNA的污染,则测序的很多reads是没有对表达量有贡献的,和其他样品相比,这个数字会偏低,这也可以用来判断是否有非mRNA的污染。
5. 其他质控方法
大家补充啊。
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kopbin

铁虫 (小有名气)

正在学习探索中。。。
每天进步一点点
2楼2012-10-22 17:13:33
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