| 查看: 2090 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
wei_suzhen新虫 (小有名气)
|
[求助]
如何克隆一段1200bp的真核基因，序列来自NCBI
|
||
| 想从黑曲霉中提取一种酶的基因，从NCBI已查找到所需基因的序列，但是宿主菌株与我们的不同。因此想通过已查到的基因序列设计引物，来PCR从我们菌株提取的DNA，进而检测我们的菌株是不是也产这种酶。这段基因序列长度是1257bp,含有两个内含子区,而且这段序列内部含有我们所加的酶切位点。通过软件primer primer5设计的引物都不是从两端开始的，现在不知道怎样设计引物来克隆这段序列的全长？？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 精华帖转载 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有218人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做染色体步移克隆了一段启动子，如何确定是否为全长呢？
已经有2人回复
5楼2012-10-07 23:33:47
2楼2012-10-07 13:04:02
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-07 17:25:47
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-07 17:25:47
| 个人感觉没必要P那么长，只是验证一下有没有这个基因可以设计一下引物P个五六百bp就可以了，所以引物没从两头开始也没关系的，另外用酶切位点的话应该不可以与其本身含的酶切位点相同，最好换一下酶切位点，要想p全长的话可以再两端各取20bp让后加上酶切位点和保护碱基，个人见解，希望对你有所帮助 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
wei_suzhen3楼2012-10-07 15:15:22
wei_suzhen
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 359
- 散金: 16
- 帖子: 79
- 在线: 64.7小时
- 虫号: 2046439
- 注册: 2012-10-07
- 专业: 微生物遗传学
4楼2012-10-07 20:44:14
