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boylover123

金虫 (初入文坛)

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[交流] 关于Transwell迁移实验的一些问题

最近在做Transwell迁移实验，但一直不是很成功，下面有几个问题想跟大家探讨一下，还请各位虫友不吝赐教。
1、上层小室加的细胞悬液为什么要含0.5%的BSA，BSA的作用是什么。
2、下层我用的是含5%FBS的培养基，曾经用过0.4%FBS的培养基，细胞没迁移过去，下层小室FBS是不是含量越低越好。
3、还有就是transwell小室实验前需不需要怎么处理一下，比如用无血清培养基浸润半个小时什么的。
4、加完细胞悬液后一般多长时间染色观察，我看文献有说5h，但是我觉得5h根本都迁移不过去。

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1楼 2012-09-29 11:04:52

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11011020032

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

14楼: Originally posted by 凝冰897 at 2012-09-29 23:36:07
迁移和侵袭我都做过，我来答吧：

1、上层小室加的细胞悬液为什么要含0.5%的BSA，BSA的作用是什么。
答：是为了保持渗透压，不至于让上室的水分渗透到下室太多，影响了药物浓度（如果加药的话）和实验结果。也可 ...

想问一下，transwell迁移实验，最后显微镜拍照的时候，拍照视野怎么选啊？要拍几张合适呢？万分感谢。