| 查看: 2351 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
zhuifeng7000至尊木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助：用BacterioMatch®II Two-Hybrid System对两个蛋白进行细菌双杂交 已有2人参与
|
|
|
1、如题，不知有谁用过这个系统进行细菌双杂交的实验？ 2、XL1-Blue MRF´ Kan这个菌有三株，其实当验证两个特定的蛋白是否有相互作用时，是否用其中的任意一株都可以的？ 3、如果两个蛋白确实是有相互作用的，在板上应该菌体应该长成什么样子？做到最后一步涂板后我的阳性对照、阴性对照还有目的菌长的都很小，菌体是否会长的比较大一点？是否会像DH5a或者Top10过夜在板上生长的样子？ 谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有140人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
13楼2014-04-09 16:51:27
11ychen
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 117.1
- 散金: 255
- 帖子: 96
- 在线: 45小时
- 虫号: 1432831
- 注册: 2011-10-09
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhuifeng7000: 金币+5, ★有帮助, 感谢交流~ 2012-11-01 23:09:23
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-11-02 13:35:12
zhuifeng7000: 金币+5, ★有帮助, 感谢交流~ 2012-11-01 23:09:23
小丹木木: 金币+3, 鼓励积极交流经验 2012-11-02 13:35:12
| 我之前也是做细菌双杂交的，XL1-Blue MRF´ Kan这个菌只是用于前期载体构建使用的，不可用于来两种蛋白相互作用的筛选，进行该步骤使用的是reporter competent cell。如果两种蛋白相互作用的话，在3-AT平板上可以长出一些单菌落，使用引物pBT F/R and pTRG F/R扩增时，是可以扩增出相应条带的。培养时间是需要很长（40h），不过结果还是可行的。不过它的菌落形态与DH5a不同。 |
2楼2012-11-01 11:35:14
zhuifeng7000
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 17625.1
- 散金: 32
- 红花: 3
- 帖子: 2108
- 在线: 88.5小时
- 虫号: 598143
- 注册: 2008-09-10
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2012-11-01 23:08:59
11ychen
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 117.1
- 散金: 255
- 帖子: 96
- 在线: 45小时
- 虫号: 1432831
- 注册: 2011-10-09
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-11-03 19:45:14
