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piaoyunokok

木虫 (正式写手)


[交流] 酿酒酵母的ORF与启动子、终止子

弱弱的问一句,
1.酿酒酵母某个基因的ORF中包括不包括启动子和终止子呢?
2.如果不包括的话,启动子和终止子在ORF的什么位置呢?应该怎样分析?
3.如果这个基因是内源基因要多表达,最后整合在基因组上,需要加上启动子和终止子吗?
多谢啦

[ Last edited by piaoyunokok on 2012-9-27 at 16:40 ]
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)


引用回帖:
8楼: Originally posted by ssrswwez at 2012-10-09 08:38:46
如果只是想表达你的目的基因,最好用它自身的启动子,若是要强表达可以选一些强启动子。

恩啊,问题是还没人研究过我这个基因的启动子呢。。。。
9楼2012-10-09 10:41:49
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★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
piaoyunokok: 金币+1, 谢谢! 2012-09-28 09:27:20
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-28 14:40:11
1、ORF不包括启动子和终止子
2、这个不好说,要参考相关文献,一般起始密码子和终止密码子上游或者下游500 bp-1500 bp左右的序列不等,保险起见,选择基因上游和下游1500 bp序列作为启动子和终止子应该没问题。
3、真核里面表达,肯定要加上启动子和终止子的。
3楼2012-09-28 08:59:36
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-09-28 08:59:36
1、ORF不包括启动子和终止子
2、这个不好说,要参考相关文献,一般起始密码子和终止密码子上游或者下游500 bp-1500 bp左右的序列不等,保险起见,选择基因上游和下游1500 bp序列作为启动子和终止子应该没问题。
3 ...

恩,可是这个基因是酵母里本来就含有的,最后也要整合到染色体上,也还是需要吗?它原来的启动子不行吗?
4楼2012-09-28 09:27:01
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★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
piaoyunokok: 金币+1 2012-10-08 11:11:41
引用回帖:
4楼: Originally posted by piaoyunokok at 2012-09-28 09:27:01
恩,可是这个基因是酵母里本来就含有的,最后也要整合到染色体上,也还是需要吗?它原来的启动子不行吗?...

它原来的启动子只能启动它自身的内源性基因,你要将该基因整合到基因组上,过表达一个拷贝,需要以 启动子-基因-终止子 这样一个完整的表达单元插入才能取到作用。
5楼2012-09-28 09:38:34
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