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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酿酒酵母的ORF与启动子、终止子
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] 酿酒酵母的ORF与启动子、终止子

弱弱的问一句，
1.酿酒酵母某个基因的ORF中包括不包括启动子和终止子呢？
2.如果不包括的话，启动子和终止子在ORF的什么位置呢？应该怎样分析？
3.如果这个基因是内源基因要多表达，最后整合在基因组上，需要加上启动子和终止子吗？
多谢啦

[ Last edited by piaoyunokok on 2012-9-27 at 16:40 ]
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1楼 2012-09-27 16:38:20
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
piaoyunokok: 金币+1, 谢谢！ 2012-09-28 09:27:20
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-28 14:40:11
1、ORF不包括启动子和终止子
2、这个不好说，要参考相关文献，一般起始密码子和终止密码子上游或者下游500 bp-1500 bp左右的序列不等，保险起见，选择基因上游和下游1500 bp序列作为启动子和终止子应该没问题。
3、真核里面表达，肯定要加上启动子和终止子的。
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3楼2012-09-28 08:59:36
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by susizheng at 2012-09-28 08:59:36
1、ORF不包括启动子和终止子
2、这个不好说，要参考相关文献，一般起始密码子和终止密码子上游或者下游500 bp-1500 bp左右的序列不等，保险起见，选择基因上游和下游1500 bp序列作为启动子和终止子应该没问题。
3 ...

恩，可是这个基因是酵母里本来就含有的，最后也要整合到染色体上，也还是需要吗？它原来的启动子不行吗？
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4楼2012-09-28 09:27:01
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susizheng

木虫 (著名写手)
★ ★
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piaoyunokok: 金币+1 2012-10-08 11:11:41
引用回帖:
4楼: Originally posted by piaoyunokok at 2012-09-28 09:27:01
恩，可是这个基因是酵母里本来就含有的，最后也要整合到染色体上，也还是需要吗？它原来的启动子不行吗？...

它原来的启动子只能启动它自身的内源性基因，你要将该基因整合到基因组上，过表达一个拷贝，需要以 启动子-基因-终止子 这样一个完整的表达单元插入才能取到作用。
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5楼2012-09-28 09:38:34
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by susizheng at 2012-09-28 09:38:34
它原来的启动子只能启动它自身的内源性基因，你要将该基因整合到基因组上，过表达一个拷贝，需要以 启动子-基因-终止子 这样一个完整的表达单元插入才能取到作用。...

哦，这样啊，谢啦！
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6楼2012-09-29 00:10:37
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
木有人回答了哦？还有一个问题：只要是酿酒酵母的启动子都可以用吗？不同基因间有差别或者可以通用吗？
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7楼2012-10-08 11:12:47
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ssrswwez

新虫 (小有名气)
★
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如果只是想表达你的目的基因，最好用它自身的启动子，若是要强表达可以选一些强启动子。
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8楼2012-10-09 08:38:46
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by ssrswwez at 2012-10-09 08:38:46
如果只是想表达你的目的基因，最好用它自身的启动子，若是要强表达可以选一些强启动子。

恩啊，问题是还没人研究过我这个基因的启动子呢。。。。
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9楼2012-10-09 10:41:49
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
★
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我也弱弱的问一句各位小虫子：同源置换的基因是不是也要加上启动子和终止子？这启动子和终止子如何加到用于置换的基因上去啊？求解啊
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10楼2013-03-22 19:53:03
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天落smile

新虫 (初入文坛)
★
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5楼: Originally posted by susizheng at 2012-09-28 09:38:34
它原来的启动子只能启动它自身的内源性基因，你要将该基因整合到基因组上，过表达一个拷贝，需要以 启动子-基因-终止子 这样一个完整的表达单元插入才能取到作用。...

请问，想要过表达一个基因，只是把他前面的启动子换成强启动子，其他不变，也就是说终止子还是原来的，可以吗？
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11楼2013-12-16 17:23:50
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yingying15882楼
2012-09-27 21:11   回复  
祝福~
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