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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 基因超表达
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[求助] 基因超表达

请问我如果做酿酒酵母一个基因的超表达，需不需要再加上启动子和终止子呢？要加入的话应该加在哪里呢（仅仅是这个基因两侧，还是在这个基因和筛选标记基因的两侧，还是其他的）？多谢
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1楼 2012-06-02 15:08:27
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
piaoyunokok: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-06-09 10:36:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoyunokok at 2012-06-04 16:08:42
是一个开放阅读框，不知道可否呢？...

如果你的基因后面还要附带表达融合蛋白的话，注意你的基因的ORF要去除终止密码子，不然后面融合蛋白的表达会受影响。
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8楼2012-06-05 13:17:09
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普通回帖

wcwluwei

禁虫 (小有名气)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-04 18:50:40
本帖内容被屏蔽
2楼2012-06-02 21:41:59
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-04 18:50:50
启动子与终止子载体自带了一般，可以加增强子片段
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3楼2012-06-02 21:55:53
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good！ 2012-06-04 18:50:59
piaoyunokok: 金币+1, ★有帮助 2012-08-13 23:15:51
如果后面还有报告基因要表达，至少你的基因不能自带终止子。
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4楼2012-06-04 10:27:19
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-06-02 21:41:59
做超标达载体时候看你选哪个载体，一般的载体都带有强启动子和终止子的，不需要单独添加，我做的超标达载体就是自己带的

那这个基因和筛选标记基因都要在这个启动子和终止子中间吗？
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5楼2012-06-04 16:07:18
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by caoluoyuan at 2012-06-02 21:55:53
启动子与终止子载体自带了一般，可以加增强子片段

？这个又是什么东东？嘻嘻
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6楼2012-06-04 16:07:50
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by draco1987 at 2012-06-04 10:27:19
如果后面还有报告基因要表达，至少你的基因不能自带终止子。

是一个开放阅读框，不知道可否呢？
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7楼2012-06-04 16:08:42
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)
★
piaoyunokok: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-06-05 23:44:42
本帖内容被屏蔽
9楼2012-06-05 22:33:14
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-06-05 22:33:14
是的  我当时订购的载体可以放两个不同基因进去的，一定要确保在启动子和终止子之间...

好的，谢谢
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10楼2012-06-05 23:44:27
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