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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[求助] 基因超表达

请问我如果做酿酒酵母一个基因的超表达,需不需要再加上启动子和终止子呢?要加入的话应该加在哪里呢(仅仅是这个基因两侧,还是在这个基因和筛选标记基因的两侧,还是其他的)?多谢
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
piaoyunokok: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-06-09 10:36:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoyunokok at 2012-06-04 16:08:42
是一个开放阅读框,不知道可否呢?...

如果你的基因后面还要附带表达融合蛋白的话,注意你的基因的ORF要去除终止密码子,不然后面融合蛋白的表达会受影响。
8楼2012-06-05 13:17:09
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普通回帖

wcwluwei

禁虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-04 18:50:40
本帖内容被屏蔽

2楼2012-06-02 21:41:59
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caoluoyuan

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-04 18:50:50
启动子与终止子载体自带了一般,可以加增强子片段
3楼2012-06-02 21:55:53
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draco1987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good! 2012-06-04 18:50:59
piaoyunokok: 金币+1, ★有帮助 2012-08-13 23:15:51
如果后面还有报告基因要表达,至少你的基因不能自带终止子。
4楼2012-06-04 10:27:19
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-06-02 21:41:59
做超标达载体时候看你选哪个载体,一般的载体都带有强启动子和终止子的,不需要单独添加,我做的超标达载体就是自己带的

那这个基因和筛选标记基因都要在这个启动子和终止子中间吗?
5楼2012-06-04 16:07:18
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by caoluoyuan at 2012-06-02 21:55:53
启动子与终止子载体自带了一般,可以加增强子片段

?这个又是什么东东?嘻嘻
6楼2012-06-04 16:07:50
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by draco1987 at 2012-06-04 10:27:19
如果后面还有报告基因要表达,至少你的基因不能自带终止子。

是一个开放阅读框,不知道可否呢?
7楼2012-06-04 16:08:42
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)

★
piaoyunokok: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-06-05 23:44:42
本帖内容被屏蔽

9楼2012-06-05 22:33:14
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wcwluwei at 2012-06-05 22:33:14
是的  我当时订购的载体可以放两个不同基因进去的,一定要确保在启动子和终止子之间...

好的,谢谢
10楼2012-06-05 23:44:27
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