24小时热门版块排行榜    

查看: 2964  |  回复: 7

rainbow8

新虫 (小有名气)


[交流] 酵母氨基酸营养缺陷型的验证问题

大家好,我做ura缺陷的酵母菌,该酵母Leu ura合成的基因被敲掉了,ura导入质粒后,在ura缺陷的平板上长出来单菌落,挑单菌落放液体培养验证,培养基同样是缺ura的,对照设既不加ura也不加leu,结果是不加ura的管生长,不加leu和ura的不长(同一个单菌落),这能证明质粒已经成功转到酵母里面了吗?还有必要再提酵母质粒或基因组或pcr验证吗?请大家帮我分析分析,谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackdogzmz

木虫 (职业作家)



rainbow8(金币+1): 谢谢参与
不懂,帮顶一下,请别人来答吧.....
2楼2012-09-27 14:26:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)



rainbow8(金币+1): 谢谢参与
既然是ura缺陷的酵母菌,为什么在ura缺陷的平板上长出来单菌落?
3楼2012-09-27 16:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houchm0927

金虫 (小有名气)


★ ★ ★
rainbow8(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-28 14:40:40
做过Y2H。个人感觉这样就可以了。我做的话,用未转化yeast用单缺-ura不生长,转化yeast用单缺-ura生长。就可以了。我当时做的时候转化结果会用菌液pcr检测的,结果证明可以。其实,看一下单缺板上酵母的形态良好基本上就是转化成功菌株。个人意见!
4楼2012-09-27 20:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainbow8(金币+1): 谢谢参与
如果你确定用的是Drop-out medium,应该是没有什么问题的,缺陷型筛选是比较准确的,相对抗性筛选来说。
6楼2012-09-28 09:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daisy143

至尊木虫 (职业作家)



rainbow8(金币+1): 谢谢参与
帮顶
7楼2012-09-28 09:54:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wt3532

木虫 (著名写手)



rainbow8(金币+1): 谢谢参与
不知道你的酵母是不是二倍体的,如果是 还要先分离单倍体
理论上讲 对照应该都不长才对啊
8楼2012-09-29 08:48:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
2012-09-27 21:10   回复  
rainbow8(金币+1): 谢谢参与
祝福~
相关版块跳转 我要订阅楼主 rainbow8 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见