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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 微滤膜除菌
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bigapplelove

铜虫 (小有名气)

[求助] 微滤膜除菌

我现在做的是蛋白酶发酵，实验室通过离心除菌，但不适合工业化生产，我们现在是先通过絮凝除菌后再过微滤膜进一步除杂，但是现在出现一种情况是，絮凝之后酶活还很高，但经过微滤膜之后回收的酶不到10%，大都被截留在截流液中，现在不知道该怎莫解决了，请问有谁知道怎么可以解决这一问题，让酶也可以通过微滤膜。
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1楼 2012-09-26 21:22:59
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bigapplelove

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by guoxaing at 2012-10-11 14:38:20
有两方面原因：1，由于微滤孔径小于蛋白质分子量，大部分蛋白质被截留了。所以有必要测一下截留液的酶活。2.微滤采用运输泵或流速过大导致蛋白质变性失活。至于哪方面自己测下就知道了，有了原因就能解决了。

嗯，您分析的有道理，至于第一条，我们膜孔径是0.8μm，理论上是可以通过100万分子量的蛋白质，而我们的酶分子量是七万五，理论上是可以过得去的，而且我们还测了截流液的酶活，80%的酶在截流液中，怀疑酶在过滤过程中可能与菌体粘附在一起吧。第二条，因为测得截流液中含有80%的酶，所以说明酶在运输的过程中应该还没有变性失活，我们现在想是不是运输泵产生静电的作用。现在正在做实验验证，非常感谢您提出的宝贵意见！望以后常交流。
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9楼2012-10-12 09:33:03
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bigapplelove: 金币+1 2012-09-27 08:55:50
没有什么板框过滤的？
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2012-09-27 01:30:45
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bigapplelove

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-09-27 01:30:45
没有什么板框过滤的？

之前做过板框过滤，过滤后酶回收率只有50%，所以现在考虑走微滤
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3楼2012-09-27 08:57:14
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
不明白酶为什么不能通过滤膜？我的样品上HPLC前都是用微膜过滤的，否则要堵塞柱子的。
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bigapplelove
4楼2012-09-29 11:55:24
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查看全部 14 个回答
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