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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆不喜欢发脾气

MolEPI: 25
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 呵呵 2012-09-24 10:17:13

嗯...................
个人觉得你把概念搞错了，PCR的时候退火是指引物和模板结合的适合温度，而溶曲中是做的是指模板半数形成单链的温度，基于SYBR的可逆结合特性，所以才可以看溶解曲线中，随着温度升高，模板变性，一半模板成单链时候，此时荧光量的程度。所以那个不叫退火。而且我觉的只要看是否单峰就行了，没有必要觉得温度过低过高吧。你把跑完的东西跑电泳，确定不要低到都是引物二聚体就可以了。
根据你的描述，这样的结果已经很好了，但是友情提示一下，qPCR里设计引物还是保证高Tm值吧，一般60度以上为宜的。