| 查看: 4754 | 回复: 18 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
如何设计引物来避免转基因植株内源基因的扩增
|
|||
|
本课题拿到这样一个转基因小麦材料，即通过基因枪方法将玉米中的一基因转到小麦中，且小麦中也有该基因，只是至今还未被克隆出来，也没有序列可供参考。该基因在玉米中表达量很高，在小麦中有微弱的表现。最近想通过荧光定量PCR的方法检测该基因在转基因小麦植株中中的表现，如何设计引物来避免内源基因的扩增呢！ 请虫友们集思广益，帮我解决这个头痛的问题吧 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有4人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
国自然评审意见
已经有15人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有13人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有14人回复
-
系统查不到
已经有11人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
送鲜花一朵 8楼2012-09-22 20:08:14
★ ★ ★ ★
xiaotian1086(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助了 2012-09-24 10:28:05
xiaotian1086(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助了 2012-09-24 10:28:05
|
嗯................ 我觉的这样没法做，如果不知道序列的话，要是同源性高的话怎么设计都会扩增出来的吧，如果可能的话，个人觉得是应该先克隆出小麦中的这个基因，如果要PCR来做外源基因检测的话，也需要构建内源基因缺陷的突变体，用干扰或用T-DNA插入来做，后将玉米的这个基因转入来看表达。本来PCR式的检测就很怕这种有干扰出现的假阳性，你越这样做的话，个人觉得很难弄。 是否可以将玉米中这个基因带上标签，转入小麦，然后用抗这个标签的抗体来Western检测蛋白水平的表达，这样来做是否可行呢？ 个人看法，若有说错请高人指点  |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2012-09-21 20:39:00
5楼2012-09-22 16:44:28
12楼2012-09-22 22:02:20
30