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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 总是无法提出植物DNA，快哭了。。。
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Bella0224

金虫 (小有名气)

[求助] 总是无法提出植物DNA，快哭了。。。

用康宁公司的提植物DNA试剂盒，怎么也提不出来，液氮磨了20分钟了，手快烂了.。。。

跑胶除了marker其他地方地点亮带都木有，上样5微升，按理说不少了啊。。。为毛就木有DNA呢。。。

到底是哪里的原因啊？？？！！！！
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1楼 2012-09-20 17:44:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ciwei052

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们用CTAB法提DNA，每次都提出来了，DNA还是很好提的。
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9楼2012-10-02 21:37:58
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普通回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
图贴上看下，1）液氮研磨加3次左右液氮，把组织研磨成粉沫状就OK了，并不需要说20分钟，认为越久磨的越好；2）你提的是啥组织，起始样本量是多少，肯定有啥原因。
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2楼2012-09-20 19:12:36
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5266720

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyfgood: 金币+5, 很有帮助，鼓励新虫多多应助交流！ 2012-09-25 23:13:38
Bella0224: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-20 13:05:20
不知道你的植物是什么，研磨后加液体水浴时，一定要注意不要剧烈震荡，所有过程也不要震荡。要轻微震荡，要是基因组DNA裂解了，那样只有一条模带，有的试剂盒也不好，不一定每次都提的出来，我以前用过天根的就经常提不出来，现在用VVI的，别的同学帮我研磨也有的提不出来，我自己研磨的就都提出来了，你要找找手感，我现在提基因组 能够把握度了，每次基本都能提出来。你上样量也不多，我都是10微升。3ulbuffer。。你也可以试试别的方法提。希望能够帮助你
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3楼2012-09-23 14:09:38
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

楼主提DNA用来做什么呢？如果只是简单做做PCR，用Edwards法即可，这几天我验证T-DNA，每天提上百个样品，没见有问题。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2012-09-24 21:02:51
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xiemin217

木虫 (正式写手)
康宁公司,有人反应东西不好用。
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5楼2012-09-25 08:59:00
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andyleier

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用液氮研磨只要组织破碎就好了，没规定时间。冰浴时间一定要控制好，不能振荡，要不就DNA就断裂了。手在拿离心管时候注意拿离心管口端，不能拿离心下面，防止降解。
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6楼2012-09-25 13:01:44
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mao19881205

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gyfgood: 应助指数+1, 有帮助！ 2012-09-26 19:50:44
不知道楼主的材料是什么植物。你试一下CTAB提DNA的方法，这个方法很管用。
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7楼2012-09-25 15:38:39
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guyuelongren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

植物的DNA很好提的哎 LZ用的什么材料啊，我们用快速提取法都不要用氯仿呢
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煮鸡蛋时蛋壳热很容易裂开，但冷了就很难找到那条缝
8楼2012-09-25 21:21:39
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xdx520

木虫 (正式写手)

仙素

【答案】应助回帖

楼主是提什么组织的，叶片的？看看是不是叶片含有多糖多酚之类的，或者操作中无意把DNA倒掉了，多多检查，建议用一次CTAB法提一下，找到原因
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10楼2012-10-08 16:21:57
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