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Bella0224

金虫 (小有名气)

[求助] 总是无法提出植物DNA,快哭了。。。

用康宁公司的提植物DNA试剂盒,怎么也提不出来,液氮磨了20分钟了,手快烂了.。。。

跑胶除了marker其他地方地点亮带都木有,上样5微升,按理说不少了啊。。。为毛就木有DNA呢。。。

到底是哪里的原因啊???!!!!
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ciwei052

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们用CTAB法提DNA,每次都提出来了,DNA还是很好提的。
9楼2012-10-02 21:37:58
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junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
图贴上看下,1)液氮研磨加3次左右液氮,把组织研磨成粉沫状就OK了,并不需要说20分钟,认为越久磨的越好;2)你提的是啥组织,起始样本量是多少,肯定有啥原因。
2楼2012-09-20 19:12:36
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5266720

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyfgood: 金币+5, 很有帮助,鼓励新虫多多应助交流! 2012-09-25 23:13:38
Bella0224: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-11-20 13:05:20
不知道你的植物是什么,研磨后加液体水浴时,一定要注意不要剧烈震荡,所有过程也不要震荡。要轻微震荡,要是基因组DNA裂解了,那样只有一条模带,有的试剂盒也不好,不一定每次都提的出来,我以前用过天根的就经常提不出来,现在用VVI的,别的同学帮我研磨也有的提不出来,我自己研磨的就都提出来了,你要找找手感,我现在提基因组 能够把握度了,每次基本都能提出来。你上样量也不多,我都是10微升。3ulbuffer。。你也可以试试别的方法提。希望能够帮助你
3楼2012-09-23 14:09:38
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

楼主提DNA用来做什么呢?如果只是简单做做PCR,用Edwards法即可,这几天我验证T-DNA,每天提上百个样品,没见有问题。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2012-09-24 21:02:51
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xiemin217

木虫 (正式写手)

康宁公司,有人反应东西不好用。
5楼2012-09-25 08:59:00
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andyleier

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用液氮研磨只要组织破碎就好了,没规定时间。冰浴时间一定要控制好,不能振荡,要不就DNA就断裂了。手在拿离心管时候注意拿离心管口端,不能拿离心下面,防止降解。
6楼2012-09-25 13:01:44
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mao19881205

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gyfgood: 应助指数+1, 有帮助! 2012-09-26 19:50:44
不知道楼主的材料是什么植物。你试一下CTAB提DNA的方法,这个方法很管用。
7楼2012-09-25 15:38:39
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guyuelongren

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

植物的DNA很好提的哎 LZ用的什么材料啊,我们用快速提取法都不要用氯仿呢
煮鸡蛋时蛋壳热很容易裂开,但冷了就很难找到那条缝
8楼2012-09-25 21:21:39
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xdx520

木虫 (正式写手)

仙素

【答案】应助回帖

楼主是提什么组织的,叶片的?看看是不是叶片含有多糖多酚之类的,或者操作中无意把DNA倒掉了,多多检查,建议用一次CTAB法提一下,找到原因
10楼2012-10-08 16:21:57
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