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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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9楼: Originally posted by xuyan_1215 at 2012-09-20 18:54:29
我再确认一下吧,已经开始做连接了,如果这一步有问题,下面根本就不能成功。两个酶切位点之间就差了29bp,双酶切之后的条带是不是也不大正常啊,怎么离5000那么近,你看呢?...

如果楼主跑的质粒是pET28a+某个大片段,这样的话酶切后连接也是有可能成功的,因为如果保留有楼主所用的酶切位点的话是可以切开的,而且可以有正常的线性pET28a,但从楼主酶切后的图来看,的确是没有发现其他的条带,这的确是诡异啊
有时候,一句话,可以改变未来
11楼2012-09-20 19:30:28
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xuyan_1215

新虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 19:30:28
如果楼主跑的质粒是pET28a+某个大片段,这样的话酶切后连接也是有可能成功的,因为如果保留有楼主所用的酶切位点的话是可以切开的,而且可以有正常的线性pET28a,但从楼主酶切后的图来看,的确是没有发现其他的条带 ...

你没有遇到过这样的问题吧?
12楼2012-09-20 21:18:25
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junminh

铜虫 (小有名气)

结果正常了,别用理论套理论,酶切后电泳的图才是正确的,一个线型,一个环形怎么比较哦。
13楼2012-09-22 16:49:04
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