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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒电泳问题
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ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by xuyan_1215 at 2012-09-20 18:54:29
我再确认一下吧，已经开始做连接了，如果这一步有问题，下面根本就不能成功。两个酶切位点之间就差了29bp，双酶切之后的条带是不是也不大正常啊，怎么离5000那么近，你看呢？...

如果楼主跑的质粒是pET28a+某个大片段，这样的话酶切后连接也是有可能成功的，因为如果保留有楼主所用的酶切位点的话是可以切开的，而且可以有正常的线性pET28a，但从楼主酶切后的图来看，的确是没有发现其他的条带，这的确是诡异啊
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有时候，一句话，可以改变未来
11楼2012-09-20 19:30:28
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xuyan_1215

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 19:30:28
如果楼主跑的质粒是pET28a+某个大片段，这样的话酶切后连接也是有可能成功的，因为如果保留有楼主所用的酶切位点的话是可以切开的，而且可以有正常的线性pET28a，但从楼主酶切后的图来看，的确是没有发现其他的条带 ...

你没有遇到过这样的问题吧？
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12楼2012-09-20 21:18:25
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junminh

铜虫 (小有名气)
结果正常了，别用理论套理论，酶切后电泳的图才是正确的，一个线型，一个环形怎么比较哦。
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13楼2012-09-22 16:49:04
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