【答案】应助回帖

9楼: Originally posted by xuyan_1215 at 2012-09-20 18:54:29
我再确认一下吧，已经开始做连接了，如果这一步有问题，下面根本就不能成功。两个酶切位点之间就差了29bp，双酶切之后的条带是不是也不大正常啊，怎么离5000那么近，你看呢？...

11楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 19:30:28
如果楼主跑的质粒是pET28a+某个大片段，这样的话酶切后连接也是有可能成功的，因为如果保留有楼主所用的酶切位点的话是可以切开的，而且可以有正常的线性pET28a，但从楼主酶切后的图来看，的确是没有发现其他的条带 ...