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曾经遥远银虫 (正式写手)
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农杆菌培养问题
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最近在做农杆菌培养,然后要做菌液pcr,这个菌是学长构建好了载体才给偶的。可是现在它有杂菌了,所以偶又重新画平板纯化。可是可是,偶真真的是菜鸟一个,遇到了两个问题,还请各位大侠支招, 问题一:我加的抗生素有利福平,可是不知道该怎么配利福平母液好? 问题二:农杆菌划平板后的培养温度是多少?是不是不能超过28°c?偶昨晚划的平板就直接放在37°c培养了,是不是都死了? ![]() ![]() |
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曾经遥远
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12楼2012-09-18 11:31:57
atlanticwi
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
曾经遥远: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-17 21:50:08
感谢参与,应助指数 +1
曾经遥远: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-17 21:50:08
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嗯....................... 1. 第一个问题我忘了怎么配了 你最好问问配过的师兄师姐 好像Rif很麻烦 如果嫌麻烦 而且你用的是GV3101株系 直接用Gen+你质粒上的抗性来筛就足够了 重点是回答你第二个问题 这个是个很重要的问题 2. 37度农杆菌当然不会死 还活的的好好的 但是高温培养会丢失Ti质粒 似乎3~6个小时培养就会全部丢失 所以农杆菌一般是低温培养保证有选择压力使Ti质粒保存下来 若你Ti质粒都丢失了 你怎么转都不成功的 个人看法 若有说错请高手指正 |

2楼2012-09-17 21:34:13
曾经遥远
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3楼2012-09-17 21:49:53
atlanticwi
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4楼2012-09-17 22:20:36















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