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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 荧光激发光谱
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小行星001

银虫 (初入文坛)

[求助] 荧光激发光谱

在做荧光激发曲线时，将监测波长固定在600nm处（激发光扫描范围220-500nm)，在300nm处有一很强的倍频峰。应如何去除这一峰啊？应如何选择滤光片？
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努力工作
1楼 2012-09-17 16:11:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

杨晓慧0307

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小行星001: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-17 21:24:05
比如说，短波的300EX filter是滤掉激发光中小于300的激发光，大于300的激发光才能打到样品上让样品激发发射荧光，当然这个滤掉的概率应该达不到百分之一百。你现在是要得到激发光谱，应该是在发射的模式下扫光谱。根据你的要求，要193和386处的激发峰，那你可以选择250-350nm的EX滤光片，不知道有没有这种规格的，你就选一种规格可以把300nm包在里面的滤光片试试。
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好好学习！
5楼2012-09-17 21:04:27
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杨晓慧0307

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小行星001 at 2012-09-17 21:34:41
谢谢了。还有我是不是也可以分两段扫描啊，把300nm的光跳过去呢...

这样光谱没有连续性啊，看起来也不好看吧，一个样品的两个激发峰在一张谱图上会不会完整些，不过要看你的用途了，也可以那样分段扫描。
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好好学习！
9楼2012-09-17 22:09:27
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普通回帖

小行星001

银虫 (初入文坛)
怎么还没人回帖啊
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努力工作
2楼2012-09-17 16:51:00
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杨晓慧0307

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小行星001: 金币+5, ★有帮助 2012-09-17 20:27:17
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来！ 2012-09-17 20:56:09
可以选300或300多一点的短波EX filter试试。你怎么确定这个300的是倍频峰而不是你的激发峰呢？
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好好学习！
3楼2012-09-17 19:52:56
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小行星001

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 杨晓慧0307 at 2012-09-17 19:52:56
可以选300或300多一点的短波EX filter试试。你怎么确定这个300的是倍频峰而不是你的激发峰呢？

这个峰的强度特别大，峰很窄且对称，测试时老师说是倍频峰。选300的短波EX filter是不是只有小于300的光可以入射到样品上啊。那么大于300的峰怎么测出来呢。我们的样品其激发峰主要是检测193和386处是否有激发峰。
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努力工作
4楼2012-09-17 20:22:35
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小行星001

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 杨晓慧0307 at 2012-09-17 21:04:27
比如说，短波的300EX filter是滤掉激发光中小于300的激发光，大于300的激发光才能打到样品上让样品激发发射荧光，当然这个滤掉的概率应该达不到百分之一百。你现在是要得到激发光谱，应该是在发射的模式下扫光谱。根 ...

非常感谢您的意思是不是选250-350nm的滤光片扫描时，小于250和大于350的光都可以通过呢
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努力工作
6楼2012-09-17 21:23:37
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杨晓慧0307

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小行星001 at 2012-09-17 21:23:37
非常感谢您的意思是不是选250-350nm的滤光片扫描时，小于250和大于350的光都可以通过呢...

理论上是的。还要分是EX还是EM的filter，分别对应起作用，就是激发的对激发光起作用，发射的对发射光起作用。
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好好学习！
7楼2012-09-17 21:25:54
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小行星001

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 杨晓慧0307 at 2012-09-17 21:25:54
理论上是的。还要分是EX还是EM的filter，分别对应起作用，就是激发的对激发光起作用，发射的对发射光起作用。...

谢谢了。还有我是不是也可以分两段扫描啊，把300nm的光跳过去呢
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努力工作
8楼2012-09-17 21:34:41
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elbarucni

金虫 (初入文坛)
可以试一下放个三百多的滤色片在材料后面的那个位置。貌似倍频原因是探测器前面的那个光栅，所以只要材料反射的300nm照不进去就没事儿，荧光600nm正常通过。然后直接220-500nm扫就行。
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10楼2012-09-18 00:54:36
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