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xylem

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白浓度过低,无法做WB,如何进行蛋白浓缩?

急着做完WB毕业,但提取蛋白的浓度太低,重新采样提蛋白已经不大可能,求高手指点蛋白经济,可靠的蛋白浓缩方法,最好附上具体的步骤。谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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akuau

木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-04-26 20:17:51
我看了上面的几个方法,
1.超滤,膜上面残留你得考虑
2.透析,如果量小的话,损失还是很恐怖的
3.硫酸铵沉淀,不利于后面跑胶,做WB
我的建议是,放冷冻干燥机里面抽真空浓缩,蛋白含量不会损失,回收率100%, ...

请问冻干之后粉末如果不能完全溶解该怎么办呢?我的样品中杂质较多,甚至要多于蛋白质,如何才能单独分离出蛋白质?
学海拾贝
17楼2014-03-06 08:54:34
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查看全部 19 个回答

xl0071334

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
硫酸铵沉淀、冻干或者是密理博的超滤管浓缩
2楼2012-09-13 09:36:35
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aixia5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
买一个millipore的超滤管就可以了,一个100左右,离心就可以了。你要的蛋白是多少KD的?
3楼2012-09-13 10:20:43
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_然然

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
放在透析袋里 peg6000透析
4楼2012-09-13 10:27:56
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