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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 蛋白浓度过低，无法做WB,如何进行蛋白浓缩？
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xylem

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白浓度过低，无法做WB,如何进行蛋白浓缩？

急着做完WB毕业,但提取蛋白的浓度太低，重新采样提蛋白已经不大可能，求高手指点蛋白经济，可靠的蛋白浓缩方法，最好附上具体的步骤。谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2012-09-12 23:06:00
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akuau

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by panyuzhu at 2013-04-26 20:17:51
我看了上面的几个方法，
1.超滤，膜上面残留你得考虑
2.透析，如果量小的话，损失还是很恐怖的
3.硫酸铵沉淀，不利于后面跑胶，做WB
我的建议是，放冷冻干燥机里面抽真空浓缩，蛋白含量不会损失，回收率100%， ...

请问冻干之后粉末如果不能完全溶解该怎么办呢？我的样品中杂质较多，甚至要多于蛋白质，如何才能单独分离出蛋白质？
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学海拾贝
17楼2014-03-06 08:54:34
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xl0071334

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
硫酸铵沉淀、冻干或者是密理博的超滤管浓缩
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2楼2012-09-13 09:36:35
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aixia5

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
买一个millipore的超滤管就可以了，一个100左右，离心就可以了。你要的蛋白是多少KD的？
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3楼2012-09-13 10:20:43
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_然然

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放在透析袋里 peg6000透析
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4楼2012-09-13 10:27:56
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