应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 请教微生物扫面电镜前处理方法
81/1返回列表
查看: 1810  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sunlinahhxx

木虫 (初入文坛)

[求助] 请教微生物扫面电镜前处理方法

本人想拍摄一株海洋真菌的扫面电镜，该菌株为单细胞，球形，一般都是处于液体培养基的培养状态下，现想请教简单可实现的扫面电镜前处理方式，求各位大神提供帮助，小女子在此拜谢~~~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-12 11:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

QIN0718

至尊木虫 (职业作家)
能否斜面培养？斜面培养到一定时期，给扫描电镜室老师帮你处理，一般的步骤是戊二醛固定加试剂固定菌种，然后风干并且喷金即可用SEM了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-12 21:39:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlinahhxx

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by QIN0718 at 2012-09-12 21:39:30
能否斜面培养？斜面培养到一定时期，给扫描电镜室老师帮你处理，一般的步骤是戊二醛固定加试剂固定菌种，然后风干并且喷金即可用SEM了。

我要考察的是液体培养状态下的细胞形态，可能用斜面会出现不一样的效果不太适合
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-13 08:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbburton

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-15 15:54:36
采用低速离心（细胞离下来的转数即可，如1000rpm-1500rpm），然后将沉淀转入2.5-4%的戊二醛中固定（2h以上，可于4度放至几天），然后再次离心，用丙酮逐级脱水（30%，50%，70%，80%，90%，100%，100%）再用叔丁醇置换，然后真空冷冻干燥，接下来将细胞粉（抽干应呈现为粉末状）涂抹在导电胶上，再将导电胶粘放到样品台上进行喷金处理，处理好的样品就可以放入扫描电镜样品室进行观察拍照了。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-09-13 09:49:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlinahhxx

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xbburton at 2012-09-13 09:49:43
采用低速离心（细胞离下来的转数即可，如1000rpm-1500rpm），然后将沉淀转入2.5-4%的戊二醛中固定（2h以上，可于4度放至几天），然后再次离心，用丙酮逐级脱水（30%，50%，70%，80%，90%，100%，100%）再用叔丁醇置 ...

还有问题想要请教，我这个样品是要送出去检测的，那么我要讲样品处理到哪一步，怎么保存？
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-13 10:55:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sunlinahhxx: 金币+10 2012-09-14 09:12:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by sunlinahhxx at 2012-09-13 10:55:17
还有问题想要请教，我这个样品是要送出去检测的，那么我要讲样品处理到哪一步，怎么保存？...

我问过电镜室老师。如果想让电镜室老师帮忙处理样品。也最好先用戊二醛固定后，再拿去。否则会产生菌体形态死亡变化
赞一下 回复此楼
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
6楼2012-09-13 19:56:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xbburton

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sunlinahhxx at 2012-09-13 10:55:17
还有问题想要请教，我这个样品是要送出去检测的，那么我要讲样品处理到哪一步，怎么保存？...

将细胞收集好后，放入戊二醛固定液中，再送检。
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-15 10:03:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rita-lee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xbburton at 2012-09-13 09:49:43
采用低速离心（细胞离下来的转数即可，如1000rpm-1500rpm），然后将沉淀转入2.5-4%的戊二醛中固定（2h以上，可于4度放至几天），然后再次离心，用丙酮逐级脱水（30%，50%，70%，80%，90%，100%，100%）再用叔丁醇置 ...

叔丁醇置换，这一步具体是怎么操作的？谢谢，新手比较迷茫。。。。
赞一下 回复此楼
8楼2015-12-26 12:02:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sunlinahhxx 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295复试调剂 +7 简木ChuFront 2026-03-19 7/350 2026-03-20 14:11 by 星空星月
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +5 Ncdx123456 2026-03-19 5/250 2026-03-20 11:15 by wangy0907
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 321求调剂 +8 何润采123 2026-03-18 10/500 2026-03-19 16:46 by 何润采123
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +10 秋有木北 2026-03-14 10/500 2026-03-19 05:52 by anny19840123
[考研] 330求调剂 +3 小材化本科 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:55 by 无懈可击111
[考研] 354求调剂 +4 Tyoumou 2026-03-18 7/350 2026-03-18 21:45 by Tyoumou
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 070300化学319求调剂 +6 锦鲤0909 2026-03-17 6/300 2026-03-18 13:22 by Iveryant
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 085601求调剂 +4 Du.11 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:08 by ruiyingmiao
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭