应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 几丁质酶测酶活的方法
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 3595  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

麦子绿豆

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 几丁质酶测酶活的方法 已有1人参与

小弟在测几丁质酶的酶活，是筛选得到的菌株进行摇瓶发酵后测酶活。
发酵培养基只含有几丁质和一些无机矿物离子，发酵三天后测活。
采用DNS法，1mg/ml的葡萄糖做标准曲线。

问题是：1）阳性对照也没有活性
2）分别对发酵液上清、粗酶液、胞内蛋白进行测活，均没有活性

附测活方法：取上清，加入缓冲液，再加入胶体几丁质，然后45度水浴过夜反应，之后终止反应，测活。以灭火的酶液做对照。

希望高手解答！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-09-10 16:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

well_想太多

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
请问楼主,你在配制胶体几丁质时采用的是浓盐酸溶解还是磷酸溶解,我看有的文献中在配制时没有用的50%的乙醇,不用可以吗?
赞一下 回复此楼
19楼2014-02-24 14:31:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

爱睡猪

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
麦子绿豆: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-11 10:47:39
你确定你发酵之后得到了你要的菌株了 ？做个镜检试试 和你接种的微生物进行对比 看是不是你要的菌株 ，也有可能该微生物没有表达这种酶  ，我们基本都不这么做 如果确定这个微生物产几丁质酶的话 那都是提DNA 测序  然后转大肠杆菌发酵  这种技术比较成熟点
赞一下(1人) 回复此楼
ControlMyself
2楼2012-09-10 16:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

麦子绿豆

管理员

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2012-09-10 16:48:54
你确定你发酵之后得到了你要的菌株了 ？做个镜检试试 和你接种的微生物进行对比 看是不是你要的菌株 ，也有可能该微生物没有表达这种酶  ，我们基本都不这么做 如果确定这个微生物产几丁质酶的话 那都是提DNA 测序  ...

谢谢！但是目前我是想先测得一株酶活较高的再去测序，鉴定。是测酶活这里卡住了，不过即使你说的方法，最后也是需要测酶活的吧～但我也准备尝试一下，谢谢！
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-11 10:47:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

num20062622

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
楼主 我也要测酶活..
但是不是测几丁质酶
是测纤维素酶活
跟果胶酶活性
也是用DNS法。
但是目前我还不是太会
希望楼主能跟我联系 求交流...
可以么 楼主..
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-09-11 17:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26申博 +4 加油冲啊！ 2026-03-26 4/200 2026-03-31 22:42 by greychen00
[考研] 一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂 +16 Micky11223 2026-03-25 17/850 2026-03-31 22:04 by 544594351
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-30 11/550 2026-03-31 17:33 by AZMK
[考研] 江苏苏北高校诚邀调剂同学 +3 zzll406 2026-03-31 3/150 2026-03-31 16:54 by 及时行乐fan
[考研] 315求调剂 +6 akie... 2026-03-28 7/350 2026-03-31 16:48 by asdfzly
[考研] 材料科学与工程调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-30 14/700 2026-03-31 16:28 by hypershenger
[考研] 353求调剂 +3 江上枫_26 2026-03-28 3/150 2026-03-31 15:53 by jp9609
[考研] 本科211生物医学工程085409求调剂339分 +7 里子木yy 2026-03-29 7/350 2026-03-31 14:35 by fmesaito
[考研] 354求调剂 +3 lxb598 2026-03-31 4/200 2026-03-31 13:42 by sophie2180
[考研] 调剂310 +13 温柔的晚安 2026-03-25 14/700 2026-03-31 13:03 by 记事本2026
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:56 by jp9609
[考研] 福建理工大学材料学院先进合金团队招收考研调剂学生 +3 大华金商都 2026-03-30 4/200 2026-03-31 01:04 by 方英俊602
[考研] 359求调剂 +5 王了个楠 2026-03-25 5/250 2026-03-30 19:36 by 源_2020
[考研] 329求调剂 +8 星野? 2026-03-26 8/400 2026-03-30 13:41 by chemdavid
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 340求调剂 +6 Amber00 2026-03-26 6/300 2026-03-29 12:06 by 无际的草原
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭