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不理解液相的两个流动相
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The quantification was performed by high performance liquid chromatography (HPLC) (Shimadzu model LC20) coupled with a UV detector (274 nm). The mobile phase was acetonitrile and water (1:1) with a flow rate of 0.8 mL/min. Fifty microliters of the sample were injected. Chromatographic separation was accomplished using the column ODS Hipersil 250 4 mm, 5-lm particles. The mobile phase was an isocratic mixture of methanol: acetonitrile at a proportion of 1:1, and the flow rate was 0.65 mL/min. 怎么理解检测和层次使用两个流动相 |
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一个是分析，一个是分离提纯。 分离提纯和分析使用不同的流动相是可行的。 从这段话看出， Hipersil 250 4mm, 5 um是被当作制备柱使用。 如果不是笔误，流动相的差别还是很大的。 不知道化合物的具体结构，从这段话中也看不出分析时使用的什么样的柱子。 如果分析和分离都是反相柱，甚至是相同的柱子，溶剂体系没有笔误的话，那么有可能是化合物在水中溶解性差，用分析流动相体系，当样品量大的时候，不利于从柱子中冲洗下来。 |
2楼2012-09-10 00:31:18
michaelye1800
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乙腈：水=1:1 分析 0.8ml/min 甲醇：乙腈=1:1 制备 0.65ml/min 色谱柱：ODS Hipersil 250 4mm, 5 um 应该是Thermo公司的C18 明显制备用的流动相洗脱能力要强于分析用的流动相，也说明你的样品亲酯性很强，用含水的流动相很难洗脱，因为制备与分析不同，制备为得到某个化合物，并非要将所有组分分开，分析是要将所有物质有效分离，故两个流动相的洗脱能力差别很大，不过作者在柱流量上作了研究，认真研究了此色谱系统的最佳线速度，在柱流量上作了调整。 |
3楼2012-09-10 07:05:58
kyle2010
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乙腈：水=1:1 分析 0.8ml/min 甲醇：乙腈=1:1 制备 0.65ml/min 色谱柱：ODS Hipersil 250 4mm, 5 um 应该是Thermo公司的C18 明显制备用的流动相洗脱能力要强于分析用的流动相，也说明你的样品亲酯性很强，用含水的流动相很难洗脱，因为制备与分析不同，制备为得到某个化合物，并非要将所有组分分开，分析是要将所有物质有效分离，故两个流动相的洗脱能力差别很大，不过作者在柱流量上作了研究，认真研究了此色谱系统的最佳线速度，在柱流量上作了调整 |
4楼2012-09-10 07:57:51