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柱层析损失样品太多,怎么办
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叶落雨枯
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柱层析损失样品太多,怎么办
我每次上柱层析,感觉下来的量都很少,一个上了35g样,只下来了10g;一个上了15g样品,之下来6g;一个上了6g样品,下来了有两三克吧,感觉这个还算多的;现在上了个小柱,1g样品,估计只下来了几十毫克。为什么会损失这么多样品啊,怎样能减少损失???
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2012-09-05 21:57:27
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张广玉417
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5楼
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Originally posted by
叶落雨枯
at 2012-09-06 09:04:49
谢谢!我看有个说法是每个梯度洗4-8个柱体积,可是我的量本来就下来的少,要是只洗4-8个柱体积的话那够用吗,我刚开始洗大柱子的时候老板说要洗到化学检测没反应后才换下一个比例,所以后来我就一直是洗到没东西时 ...
看到这一楼我就知道你为什么少了 ,每个梯度2个体积就是最好了,你太多了的话肯定吸附,别的原因都不用看不用找,就是这个原因。我们要求走完死体积3个小时之内把柱子过下来。
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26楼
2015-06-11 21:33:35
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dmm1111
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2012-09-06 09:18:23
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
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2012-09-05 23:03:34
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wangfei.ac
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2012-09-06 09:18:28
不宜洗脱过长的时间,时间越长,死吸附越严重;极性中等或中等偏大的,还是采用反相材料为好,损失小。
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3楼
2012-09-06 08:41:27
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叶落雨枯
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2楼
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dmm1111
at 2012-09-05 23:03:34
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
谢谢!我一直都是采用的拌样的方法, 干法湿法对样品没有什么要求吗,是不是只要溶解性好的都可以采用湿法上样
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4楼
2012-09-06 08:58:32
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