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柱层析损失样品太多,怎么办
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叶落雨枯
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[交流]
柱层析损失样品太多,怎么办
我每次上柱层析,感觉下来的量都很少,一个上了35g样,只下来了10g;一个上了15g样品,之下来6g;一个上了6g样品,下来了有两三克吧,感觉这个还算多的;现在上了个小柱,1g样品,估计只下来了几十毫克。为什么会损失这么多样品啊,怎样能减少损失???
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1楼
2012-09-05 21:57:27
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叶落雨枯
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3楼
:
Originally posted by
wangfei.ac
at 2012-09-06 08:41:27
不宜洗脱过长的时间,时间越长,死吸附越严重;极性中等或中等偏大的,还是采用反相材料为好,损失小。
谢谢!我看有个说法是每个梯度洗4-8个柱体积,可是我的量本来就下来的少,要是只洗4-8个柱体积的话那够用吗,我刚开始洗大柱子的时候老板说要洗到化学检测没反应后才换下一个比例,所以后来我就一直是洗到没东西时才换的比例,但是后来发现这样洗下来的东西也很少而且花费时间太长,
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5楼
2012-09-06 09:04:49
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dmm1111
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leecius: 金币+1, 谢谢参与。
2012-09-06 09:18:23
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
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2楼
2012-09-05 23:03:34
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wangfei.ac
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2012-09-06 09:18:28
不宜洗脱过长的时间,时间越长,死吸附越严重;极性中等或中等偏大的,还是采用反相材料为好,损失小。
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3楼
2012-09-06 08:41:27
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叶落雨枯
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:
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dmm1111
at 2012-09-05 23:03:34
硅胶吸附严重,可以湿法上样,或者用葡聚糖柱子可以减少损失
谢谢!我一直都是采用的拌样的方法, 干法湿法对样品没有什么要求吗,是不是只要溶解性好的都可以采用湿法上样
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4楼
2012-09-06 08:58:32
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