24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1439  |  回复: 11
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+5, MolEPI+1, 赞同哦 2012-09-05 14:01:39
M110935: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-09-05 14:11:27
额,看了上面的回答有点无语,楼主注意一下一下几点:
1 首先检查感受态质量,建议做一个对照试验,找个以前能转化出来的质粒作对照。
2 质粒转化只需要加1微升足以,至于步骤严格按照传统方法进行,另外需要说明的是,PET系列载体是原核表达载体,拷贝数比一般质粒要低很多,转化前最好测一下质粒浓度,保证有50ng转化就行了。
3 还是拷贝数的问题,由于PET载体的特殊性,提取质粒收菌要非常多,一般小提收菌要在6毫升以上,而且菌液还要浓一些,就这样,提取的质粒浓度都不是非常大,所以也有可能是收菌太少导致质粒浓度过低看不出条带。
4 转化过程本身一般不会有问题,容易有问题的就是感受态和抗生素,还是建议做对照来排除这两个因素。
11楼2012-09-05 11:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

M110935

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by huguangdong at 2012-09-05 11:24:13
额,看了上面的回答有点无语,楼主注意一下一下几点:
1 首先检查感受态质量,建议做一个对照试验,找个以前能转化出来的质粒作对照。
2 质粒转化只需要加1微升足以,至于步骤严格按照传统方法进行,另外需要说明 ...

非常感谢,真的很有帮助。我会再试试
12楼2012-09-05 14:11:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 M110935 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +10 老师看看我吧aba 2026-04-09 11/550 2026-04-10 10:41 by cal0306
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +24 努力奋斗112 2026-04-07 27/1350 2026-04-10 09:56 by may_新宇
[考研] 080100力学316求调剂 +7 L_Hairui 2026-04-07 7/350 2026-04-10 09:45 by vgtyfty
[考研] 307求调剂 +5 tzq94092 2026-04-10 5/250 2026-04-10 08:51 by yongzhesheng
[考研] 0703化学 +31 妮妮ninicgb 2026-04-04 35/1750 2026-04-09 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 化工求调剂! +34 RichLi_ 2026-04-06 34/1700 2026-04-09 20:39 by zhouxiaoyu
[考研] 332,085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 一志愿北京2,材料与化工308求调剂 +17 熊二想上岸 2026-04-04 18/900 2026-04-09 09:13 by leyan1127
[考研] 一志愿南昌大学,085600,344分求调剂 +11 调剂上岸玘 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:17 by luoyongfeng
[考研] 化学0703-一志愿211-338分求调剂 +10 vants 2026-04-05 11/550 2026-04-08 16:02 by screening
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 材料工程专业日语生求调剂 +9 111623 2026-04-07 9/450 2026-04-07 23:31 by 一只好果子?
[考研] 计算机11408 287 求调剂 +3 LiLe5 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:15 by shanqishi
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 327考研调剂推荐 +6 呜呜呜呜呢 2026-04-06 6/300 2026-04-06 21:39 by 啵啵啵0119
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-05 5/250 2026-04-05 17:38 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
信息提示
请填处理意见