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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » miRNA反转录后PCR产物跑电泳，有点拖尾，什么原因啊？真心求助！！
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229668880

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学，我也做miRNA定量PCR，但是无模板阴性对照都有产物，跑胶结果，无模板组和实验组的产物胶上位置一样。我该怎么办啊？
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11楼2012-10-15 20:40:27
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没入尘埃5

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 229668880 at 2012-10-15 20:40:27
同学，我也做miRNA定量PCR，但是无模板阴性对照都有产物，跑胶结果，无模板组和实验组的产物胶上位置一样。我该怎么办啊？

我觉得有可能你的实验组的条带也不是目的基因，而是引物二聚体，再有可能就是你的电泳缓冲液已经有基因污染，换新的电泳缓冲液试试看，你的引物是怎么设计的？
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如果不努力，肯定没收获！
12楼2012-10-16 09:15:56
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微笑lili

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看你的8泳道基本没拖尾，如果用的是相同的模板，不同的引物，说明你2、4、6的引物设计的不好，需要重新设计
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13楼2012-11-05 00:27:36
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linaiqin

铁虫 (初入文坛)
我想在这里问下大家，miRNA 荧光定量PCR扩增后的产物片段大小是怎么知道的？我看很多文献上说大概80bp大小，但一般miRNA不是只有20bp左右吗，不明白？希望知道的大侠告诉下，谢谢！
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14楼2013-12-04 09:58:29
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