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铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学，我也做miRNA定量PCR，但是无模板阴性对照都有产物，跑胶结果，无模板组和实验组的产物胶上位置一样。我该怎么办啊？

11楼2012-10-15 20:40:27

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金虫 (小有名气)

引用回帖:

11楼: Originally posted by 229668880 at 2012-10-15 20:40:27
同学，我也做miRNA定量PCR，但是无模板阴性对照都有产物，跑胶结果，无模板组和实验组的产物胶上位置一样。我该怎么办啊？

我觉得有可能你的实验组的条带也不是目的基因，而是引物二聚体，再有可能就是你的电泳缓冲液已经有基因污染，换新的电泳缓冲液试试看，你的引物是怎么设计的？

如果不努力，肯定没收获！

12楼2012-10-16 09:15:56

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新虫 (初入文坛)

看你的8泳道基本没拖尾，如果用的是相同的模板，不同的引物，说明你2、4、6的引物设计的不好，需要重新设计

13楼2012-11-05 00:27:36

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铁虫 (初入文坛)

我想在这里问下大家，miRNA 荧光定量PCR扩增后的产物片段大小是怎么知道的？我看很多文献上说大概80bp大小，但一般miRNA不是只有20bp左右吗，不明白？希望知道的大侠告诉下，谢谢！

14楼2013-12-04 09:58:29

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