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废哥117

银虫 (小有名气)


[交流] 关于使用液氮提取动物组织蛋白的问题

大家用液氮提取蛋白的一般流程是什么?用得到研钵吗?那研钵是玻璃的好还是陶瓷的好呢?
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jozsh

新虫 (小有名气)


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yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-09-01 21:01:47
就是加液氮,研磨到粉末状~加入一定量到1.5ML管子里面,加入裂解液,然后用超生波,超一下~(2秒超声,8秒间隔)。超5-10分钟。即可进入下一步蛋白定量。。。。。。。我们都是用陶瓷的。。。这个无所谓吧
2楼2012-09-01 17:23:01
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codexg

新虫 (初入文坛)


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wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2012-10-19 01:28:33
废哥117: 回帖置顶 2012-10-24 09:55:33
切记,如果提取的蛋白用来做CO-IP的,那么禁用液氮。而且必须用作用较柔和的裂解液。此外有一个小窍门,你可以用锡箔纸包住组织后加液氮捣碎,这样冻住的组织就不会因为你不小心砸飞的情况。
3楼2012-10-18 22:25:43
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废哥117

银虫 (小有名气)


引用回帖:
3楼: Originally posted by codexg at 2012-10-18 22:25:43
切记,如果提取的蛋白用来做CO-IP的,那么禁用液氮。而且必须用作用较柔和的裂解液。此外有一个小窍门,你可以用锡箔纸包住组织后加液氮捣碎,这样冻住的组织就不会因为你不小心砸飞的情况。

那锡箔纸会不会被捣碎?
4楼2012-10-21 14:37:09
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codexg

新虫 (初入文坛)


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包锡纸只是避免你砸碎的组织飞溅。砸开了就可以把锡纸拿去了。
5楼2012-10-21 23:14:27
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