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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细菌要加甘油放-20预冷后才放-80，那么血、水果或其它样品要放-80呢？
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danyzj01

银虫 (正式写手)

[求助] 细菌要加甘油放-20预冷后才放-80，那么血、水果或其它样品要放-80呢？

可以直接放-80吗，还是要预冷，预冷半小时够吗？还是不加甘油的样品要等它完全凝固后再转移-80？
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1楼 2012-08-31 22:08:00
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constra

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细菌不是直接近液氮的么？从来没有预冷过。细胞什么的就不一样了，要阶段式冻存
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2楼2012-08-31 22:20:46
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jjg0912

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室是这样的，保存菌种用冻存管。80%的甘油250微升+菌液750微升，涡旋充分混合，然后直接放入-80°。不需要放在-20下预冷。效果还蛮好的。
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3楼2012-08-31 23:16:05
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jjg0912 at 2012-08-31 23:16:05
我们实验室是这样的，保存菌种用冻存管。80%的甘油250微升+菌液750微升，涡旋充分混合，然后直接放入-80°。不需要放在-20下预冷。效果还蛮好的。

如果是血液、水果或其它液态样品之类又不加甘油的话，是直接放-80度，还是要-20预冷甚至要预冷到结冰状态再转移-80？
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4楼2012-09-01 07:51:21
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ILUGEGE

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

水果直接放-80，和细菌这些是不一样的。
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5楼2012-10-03 19:42:05
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ILUGEGE at 2012-10-03 19:42:05
水果直接放-80，和细菌这些是不一样的。

只有细菌需要甘油保护吗，细胞、血液和蛋白什么的都不需要吗？
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6楼2012-10-04 12:41:14
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zhangfeibird

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by danyzj01 at 2012-10-04 12:41:14
只有细菌需要甘油保护吗，细胞、血液和蛋白什么的都不需要吗？...

加甘油的目的是为了使细胞膜不会在低温下结晶，结构受到破坏。至于血液不知道你说的是血浆还是血细胞啊，要用于什么目的啊？血浆可以放在液氮里冻住后再放进-80，水果没试过。组织样品可以放在液氮里冻好，再转移到-80度，提RNA问题不大。
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7楼2012-10-04 12:54:22
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danyzj01

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangfeibird at 2012-10-04 12:54:22
加甘油的目的是为了使细胞膜不会在低温下结晶，结构受到破坏。至于血液不知道你说的是血浆还是血细胞啊，要用于什么目的啊？血浆可以放在液氮里冻住后再放进-80，水果没试过。组织样品可以放在液氮里冻好，再转移到 ...

血浆、组织样品必须液氮冻住吗，用-20预冻可以吗？如果可以的话要多长时间
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8楼2012-10-04 16:51:11
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