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米兔7

新虫 (初入文坛)

[交流] 线虫DNA提取不出来 已有1人参与

小虫最近在提取线虫DNA,可是提了很多次均提取不出来。
提取方法如下:将单条线虫放于缓冲液中,加3ul蛋白酶K(600ug/ml),于-20℃ 10min,65℃ 1h,95℃15min,放于-20℃保存。跑电泳检测检测不出来,直接拿来做PCR也P不出来。
尝试试验:可能提取的DNA太微量,电泳检测不宜检测出来,于是挑取大量线虫和数条线虫分别提取DNA电泳检测,仍然没有结果。
是在是没办法了,各位虫友发表意见,帮帮忙。
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elric

新虫 (著名写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是你的线虫lysis buffer不好使,我的实验条件是65℃10min,-75℃ 10min,然后再加蛋白酶K,之后65℃ 1h,95℃15min,直接在PCR仪上做就可以,最后稍离心,放-20℃保存
2楼2012-12-02 03:13:37
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