24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 3481  |  回复: 26

little_Jimmy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 欢迎来微生物板块交流 2012-09-08 17:03:55
一下建议不知道是否有帮助1.检查培养基的制备,pH及成分比例是否符合。2.倒的平板最好是第二天使用,确认无染菌。3.建议预实验梯度使用-1至-7,每个梯度三个重复,在制备下一梯度菌悬液时用移液枪吸打三次,充分混匀。4.有条件接菌后使用封口膜将平板四周封上。5.因为细菌生长速度很快,要经常观察。
我们都是小吉米
11楼2012-09-01 14:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fliuyang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
涂布棒凉久一点,太热不行
12楼2012-09-01 16:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hotsauce

金虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by little_Jimmy at 2012-09-01 14:58:06
一下建议不知道是否有帮助1.检查培养基的制备,pH及成分比例是否符合。2.倒的平板最好是第二天使用,确认无染菌。3.建议预实验梯度使用-1至-7,每个梯度三个重复,在制备下一梯度菌悬液时用移液枪吸打三次,充分混匀 ...

我也刚开始做青藏高原土壤微生物,培养基应该没问题,可是总是培养不出细菌。所以我怀疑是不是菌悬液有什么问题,我的做法是将冷冻在-20摄氏度的土壤在无菌操作台上分装入5mL离心管,后将离心管放入4摄氏度冰箱活化24小时,最初的土壤悬液在振荡器上已120转每分钟振荡20分钟,制备其他梯度时因为试管太长,就还是在振荡器上振荡5分钟,其他无菌操作也没什么问题,求指导!
13楼2012-09-01 21:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

little_Jimmy

银虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by hotsauce at 2012-09-01 21:08:01
我也刚开始做青藏高原土壤微生物,培养基应该没问题,可是总是培养不出细菌。所以我怀疑是不是菌悬液有什么问题,我的做法是将冷冻在-20摄氏度的土壤在无菌操作台上分装入5mL离心管,后将离心管放入4摄氏度冰箱活化 ...

没有分离过极端微生物,有一些微生物在实验室的条件下是不可培养的,原来分离解冻土中的微生物时我一般是取土样后在室温活化24h后再培养。
我们都是小吉米
14楼2012-09-01 23:52:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovestrings

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果计数结果是很重要的,推荐用玻璃珠涂布,这样就不会有一大片一大片菌膜出现了,也比较好数~~~
15楼2012-09-02 08:59:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by lovestrings at 2012-09-02 08:59:13
如果计数结果是很重要的,推荐用玻璃珠涂布,这样就不会有一大片一大片菌膜出现了,也比较好数~~~

不好意思,“用玻璃珠涂布”不是太明白,还请详细告知,不胜感激!
16楼2012-09-02 09:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangtao253

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人做此类实验有点点经验,可提供小些经验。首先最重要的当然是菌悬液的制备,一定要均匀,于是要求一定要确保做到混匀,可用涡旋混匀器或者玻璃棒剧烈搅打(需注意你的菌是否对此过于敏感)。然后是平板的制备,平板制备好以后要观察固体培养基的含水量,一般以表面看上去不是很干燥无龟裂现象为好,一定要有时间让培养基水分蒸发一部分,大概平板准备好以后可以用牛皮纸包起来放在培养箱里吸干水分。然后便是涂布,一定做到将菌悬液在培养基上涂干方可。注意一些细节,做出来的梯度是很明显的。希望能帮到你
17楼2012-09-02 09:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovestrings

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1.选取玻璃珠一般直径1mm-3mm,新的玻璃珠用稀盐酸浸泡,用纯水洗干净(也可用自来水),烘干,用三角瓶装好,灭菌。
2.移取菌液置于平皿中,将灭好菌的玻璃珠10颗左右,倒入平皿,顺时针摇晃几下,再逆时针摇晃几下,估计要均匀就可以了
3.将玻璃珠倒出来。
4.平皿培养。
转自newtime007
这个方法我自己用过,确实好用,涂布出来的效果很好,菌落每个都均匀分散开,计数很方便,但是如果你不需要计数,只是分离,这个方法就麻烦了点
18楼2012-09-02 10:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiyasong

木虫 (著名写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by lovestrings at 2012-09-02 10:04:42
1.选取玻璃珠一般直径1mm-3mm,新的玻璃珠用稀盐酸浸泡,用纯水洗干净(也可用自来水),烘干,用三角瓶装好,灭菌。
2.移取菌液置于平皿中,将灭好菌的玻璃珠10颗左右,倒入平皿,顺时针摇晃几下,再逆时针摇晃几 ...

谢谢!
19楼2012-09-02 10:21:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hotsauce

金虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by little_Jimmy at 2012-09-01 23:52:24
没有分离过极端微生物,有一些微生物在实验室的条件下是不可培养的,原来分离解冻土中的微生物时我一般是取土样后在室温活化24h后再培养。...

你们的冻土保存方法是怎样的?也是-20摄氏度么?
20楼2012-09-03 16:29:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 719140139 的主题更新
信息提示
请填处理意见