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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE电泳，什么原因导致这种。有图有真相。谢谢各位给出宝贵意见！
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红虫梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by rice1007 at 2012-08-30 11:14:14
很可能是胶没做好的原因：1、胶没有混匀；2、浓缩胶与分离胶接触面不平整；3、胶里有气泡留下小空隙。我开始跑时也这样，跑多了就熟悉了，那就好了。
传一张我跑的照片。
87/97/1551433_1346296446_955.jpg|2
1.JP ...

这些跑得好
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梦想
11楼2012-09-03 15:27:01
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芥末猫

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 胡志林 at 2012-08-30 10:57:28
我感觉不是胶的问题，marker跑的挺好看的，估计是上样量太多，或者是蛋白浓度测得不准。祝实验顺利……

你好 能否请教一般上样多少为宜？？初做这个，想多学习，我用大梳子，上样10微升，感觉跑出来挺难看的
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12楼2012-12-17 09:59:40
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芥末猫

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by rice1007 at 2012-08-30 11:14:14
很可能是胶没做好的原因：1、胶没有混匀；2、浓缩胶与分离胶接触面不平整；3、胶里有气泡留下小空隙。我开始跑时也这样，跑多了就熟悉了，那就好了。
传一张我跑的照片。

1.JPG
...

你这个真漂亮，有什么诀窍可以分享吗？这是上样多少啊，还有为什么背景会这么清晰呢？？
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13楼2012-12-17 10:02:47
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alps1999

木虫 (正式写手)

木虫帝国南院院士
引用回帖:
8楼: Originally posted by rice1007 at 2012-08-30 11:14:14
很可能是胶没做好的原因：1、胶没有混匀；2、浓缩胶与分离胶接触面不平整；3、胶里有气泡留下小空隙。我开始跑时也这样，跑多了就熟悉了，那就好了。
传一张我跑的照片。

1.JPG
...

跑得太漂亮了，羡慕嫉妒恨啊~
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既然选择了远方，便只顾风雨兼程～
14楼2012-12-17 22:03:22
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porphybaby

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

好像有某几个孔上样量太大了？

marker都跑得还可以。而且marker附近的几个孔仔细看其实还可以的，反而好像上样上得有点少。

然后还有就是可能你的胶有点问题。会不会是你浓缩胶和分离胶之间有些空隙，没凝好，然后有些蛋白就弥散到其他地方了？
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15楼2012-12-18 00:10:29
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sw0401aa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

从MARKER的泳道来看,选择的胶浓度有点高.高分子量的MARKER都没跑下去.可以适当把分离胶的浓度降低点.另处MARKER的条带是斜的,跑胶时胶没放正.感觉你的胶放的时间太久了.而且上样时浓缩胶上的孔大小不均一.
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16楼2012-12-18 12:02:50
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sw0401aa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

想要背景清晰的话可以把经过脱色的胶再用清水泡一晚上.第二天看就特别清析了
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17楼2012-12-18 12:04:26
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crystal9002

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

胶配置的不均匀，倒入玻璃板的时候速度过快 应缓缓倒入
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18楼2013-06-06 03:40:51
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xiaohong1213

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1 根据marker判断，，估计是剩余的点样孔有气泡。
2 浓缩胶和分离胶不清楚。需好好制胶。
3 如果上样液里面盐离子浓度过高，需去盐，效果会好很多。当然上样量也有点大哦！
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19楼2013-06-06 12:14:40
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许许小静

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by rice1007 at 2012-08-30 11:14:14
很可能是胶没做好的原因：1、胶没有混匀；2、浓缩胶与分离胶接触面不平整；3、胶里有气泡留下小空隙。我开始跑时也这样，跑多了就熟悉了，那就好了。
传一张我跑的照片。

1.JPG
...

这胶  跑的好漂亮，求高手指点。。。。
我跑的是活性胶，所以样品不煮。。。而且分离胶配制的时候加入了纤维素酶分解底物。。。
样品是 提的粗蛋白。。。为什么不能像你这样跑的条带如此清晰 呢。。。分的这么开呢？
还有你的上样量 是多少 微升呢？蛋白浓度一般是多少？
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20楼2013-06-20 10:34:38
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