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红虫梦

新虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE电泳，什么原因导致这种。有图有真相。谢谢各位给出宝贵意见！

用的是15%的胶，目的蛋白为13.5KD。怎么跑的一点都不清晰，还有后面怎么又严重的拖尾现象，请各位大侠给出点意见。




2012-08-29 08.56.09.jpg
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梦想
1楼 2012-08-29 09:02:57
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许许小静

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by rice1007 at 2012-08-30 11:14:14
很可能是胶没做好的原因：1、胶没有混匀；2、浓缩胶与分离胶接触面不平整；3、胶里有气泡留下小空隙。我开始跑时也这样，跑多了就熟悉了，那就好了。
传一张我跑的照片。

1.JPG
...

这胶  跑的好漂亮，求高手指点。。。。
我跑的是活性胶，所以样品不煮。。。而且分离胶配制的时候加入了纤维素酶分解底物。。。
样品是 提的粗蛋白。。。为什么不能像你这样跑的条带如此清晰 呢。。。分的这么开呢？
还有你的上样量 是多少 微升呢？蛋白浓度一般是多少？
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20楼2013-06-20 10:34:38
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-29 16:28:26
胶的浓度时没有问题的，marker和旁边的两个泳道跑的也还是不错，后面几个泳道是不是样品制备的问题，或者上样量太多了，又或者胶不均一，你从这几个方面下下功夫，应该是没问题的。
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生物化学与分子生物学
2楼2012-08-29 11:42:28
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lanziliuli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是样品制备的问题
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做好科研
3楼2012-08-29 11:48:19
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
减少上样量。点样之前请再次告诉离心。
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4楼2012-08-29 12:00:20
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