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wfthattie

铜虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-08-28 05:27:29
离心取上清,说明肯定有不溶物,进样前也应该过膜。

过膜是保护作用,通常都要过膜。

当不溶物量大,过膜困难,应该先离心。离心不能替代过膜,过膜可替代离心。

请问,由于液相条件极性小,过膜后,膜中的小极性物质会溶入样品溶液(流动相为溶剂),并出峰,影响正常积分。这种情况下,可以只离心吗?
谢谢!!
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21楼2013-03-18 10:59:58
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by wfthattie at 2013-03-18 10:59:58
请问,由于液相条件极性小,过膜后,膜中的小极性物质会溶入样品溶液(流动相为溶剂),并出峰,影响正常积分。这种情况下,可以只离心吗?
谢谢!!...

膜中会有影响你们液相的小极性物质?
不做方法学验证吗?不进空白溶剂看有没有影响?极性物质一般也不保留啊,会跟溶剂峰出来,再说膜上也不会有强吸收的杂质吧,用的啥膜啊?
22楼2013-03-18 11:34:11
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wfthattie

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by lzgxgz at 2013-03-18 11:34:11
膜中会有影响你们液相的小极性物质?
不做方法学验证吗?不进空白溶剂看有没有影响?极性物质一般也不保留啊,会跟溶剂峰出来,再说膜上也不会有强吸收的杂质吧,用的啥膜啊?...

就是在做方法学验证中发现的。我用的是有机滤膜,空白溶剂有的,不光是滤膜,塑料吸管中的小极性物质也会溶入流动相(乙腈-水 70:30),形成峰。
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23楼2013-03-18 12:47:07
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
23楼: Originally posted by wfthattie at 2013-03-18 12:47:07
就是在做方法学验证中发现的。我用的是有机滤膜,空白溶剂有的,不光是滤膜,塑料吸管中的小极性物质也会溶入流动相(乙腈-水 70:30),形成峰。...

可以在检测中扣除溶剂峰,能分离开不?不能就换膜换条件
是定量还是有关物质,定量只要跟主峰分开就没问题,有关物质跟个空白溶剂扣除干扰。
24楼2013-03-18 12:54:32
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wfthattie

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
24楼: Originally posted by lzgxgz at 2013-03-18 12:54:32
可以在检测中扣除溶剂峰,能分离开不?不能就换膜换条件
是定量还是有关物质,定量只要跟主峰分开就没问题,有关物质跟个空白溶剂扣除干扰。...

换过聚四氟乙烯膜,也还是有那个峰,条件没换。是检测已知杂质,要定量检测的。你的意思是一定要过膜,是吗?
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25楼2013-03-18 13:54:03
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

离心其实应该是首选方法,过滤,多一步转移操作,与外部接触的机会大很多,不确定性增加很多。受仪器条件和效率限制,常采取过滤替代,只有一个优点:简单方便,但很多情况下滤膜都不适用的。
1.浓度低的情况下,有滤膜吸附、滤膜溶出液、需要样品量多、不适用于胶质溶液等很多限制,回收率很难保证,做有关物质时,未知杂质会不会被吸附很难验证,
2.难容药物,高浓度下,溶液中会存在很多药物粒子,粒径分散的很,0.45um只能过滤掉以上直径的粒子,高速离心,只要时间够长,理论上粒子应该都会沉降的。
所以有高速离心机和时间的推荐离心吧,用国产膜那就是个杯具。
怕液相堵,加个柱前过滤器或预柱就行了。
26楼2013-03-18 14:35:58
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

引用回帖:
25楼: Originally posted by wfthattie at 2013-03-18 13:54:03
换过聚四氟乙烯膜,也还是有那个峰,条件没换。是检测已知杂质,要定量检测的。你的意思是一定要过膜,是吗?...

能过就过,不能过就像楼上说的加个预柱吧。
其实过滤不是必须的,这些预处理只是为了柱子考虑,我们以前有个项目是乳剂,过滤后都是混浊的,照样进样,只是柱子的寿命短些,也是装预柱,勤更换成本高点就是了。
我想说的是,你过滤有杂质,如果完全分离,不影响定量控制,其实有也没事。
27楼2013-03-18 15:56:00
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wfthattie

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by lzgxgz at 2013-03-18 15:56:00
能过就过,不能过就像楼上说的加个预柱吧。
其实过滤不是必须的,这些预处理只是为了柱子考虑,我们以前有个项目是乳剂,过滤后都是混浊的,照样进样,只是柱子的寿命短些,也是装预柱,勤更换成本高点就是了。
...

嗯,非常感谢你耐心地解释!!
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28楼2013-03-18 16:41:08
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