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mxx7456

新虫 (小有名气)

[求助] 进液相的样品,离心取上清液和0.45um过滤有什么区别

HPLC样品配置时,什么时候选择用离心取上清液,什么时候用0.45um滤膜过滤。两者有什么区别?
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

离心其实应该是首选方法,过滤,多一步转移操作,与外部接触的机会大很多,不确定性增加很多。受仪器条件和效率限制,常采取过滤替代,只有一个优点:简单方便,但很多情况下滤膜都不适用的。
1.浓度低的情况下,有滤膜吸附、滤膜溶出液、需要样品量多、不适用于胶质溶液等很多限制,回收率很难保证,做有关物质时,未知杂质会不会被吸附很难验证,
2.难容药物,高浓度下,溶液中会存在很多药物粒子,粒径分散的很,0.45um只能过滤掉以上直径的粒子,高速离心,只要时间够长,理论上粒子应该都会沉降的。
所以有高速离心机和时间的推荐离心吧,用国产膜那就是个杯具。
怕液相堵,加个柱前过滤器或预柱就行了。
26楼2013-03-18 14:35:58
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhychen2008: 金币+1, 多谢参与 2012-08-27 22:31:52
离心取上清,用于样品分离纯化,除去有可能影响样品分析的杂质或颗粒。液相时不一定都用到。
滤膜过滤,在进样前使用,理论上,进液相都必须经过微孔滤膜过滤处理,除去小颗粒杂质,防止堵塞色谱柱。
守候在风中的宁静。
2楼2012-08-27 22:23:07
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 多谢参与 2012-08-28 15:31:48
离心取上清,说明肯定有不溶物,进样前也应该过膜。

过膜是保护作用,通常都要过膜。

当不溶物量大,过膜困难,应该先离心。离心不能替代过膜,过膜可替代离心。
3楼2012-08-28 05:27:29
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1340412959

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
痴夷子皮: 金币+1, 多谢参与 2012-08-28 15:31:55
同意楼上!液相样品进样之前都要过膜的~
摆正心态~~~冷静冷静再冷静!
4楼2012-08-28 08:51:17
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