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DNA提取
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最近在帮别人提桃的DNA，可是我试了几乎所有ctab提取DNA的方法，都不凑效。现在的问题是用异丙醇沉淀DNA时，可见白色沉淀，但下一步用乙醇沉淀时，就成了果冻！我就用除多糖的方法去消除，可是根本不管用。有那位大侠做过相关的工作，指点一下迷津。谢谢了！ 原来在提DNA时的问题解决了，现在又遇到了新的问题。 我提的是桃的DNA，走的路线是用提取缓冲液先除一下细胞间的杂质，后用CTAB裂解，再后是加氯仿-异戊醇，苯酚-氯仿-异戊醇，氯仿-异戊醇，再加1/10体积的NaAc，二倍体积的无水乙醇，得到沉淀，再用70%乙醇洗，到这都好着呢，在消化DNA时用的是氯仿-异戊醇，1/10体积的NaAc，二倍体积的无水乙醇，可到了这儿就又有点像果冻了，跑电泳显示有杂质，不知该怎么办？ 我用的离心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-4 at 08:35 ] |
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6楼2007-05-30 22:06:25
randomqd
木虫 (小有名气)
樱花骑士
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7楼2007-05-30 22:20:27
hallhowe
木虫 (正式写手)
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8楼2007-05-30 22:35:29
plantsoil(金币+0):请将此内容编辑到一楼，便于其他人看到，原内容建议保留。同时注意版规http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=488080
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谢谢各位虫友的回答。原来在提DNA时的问题解决了，现在又遇到了新的问题。 我提的是桃的DNA，走的路线是用提取缓冲液先除一下细胞间的杂质，后用CTAB裂解，再后是加氯仿-异戊醇，苯酚-氯仿-异戊醇，氯仿-异戊醇，再加1/10体积的NaAc，二倍体积的无水乙醇，得到沉淀，再用70%乙醇洗，到这都好着呢，在消化DNA时用的是氯仿-异戊醇，1/10体积的NaAc，二倍体积的无水乙醇，可到了这儿就又有点像果冻了，跑电泳显示有杂质，不知该怎么办？ 我用的离心速度都是12000rpm,5min. [ Last edited by maii on 2007-6-3 at 13:32 ] |
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