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自然_法则

银虫 (初入文坛)

[求助] 核酸电泳图

图中带1，2是同一种PCR产物，3，4也是同一种PCR产物，5是Marker2000,6,7是质粒的DNA 无果（没有加RNA酶）8是Marker10000。 我用的染料是Ultra Power 25ml胶里加入2.5ul 染料。求解释为什么条带不整齐 越往上条带越模糊 谢谢

核酸电泳图PCR产物
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每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
1楼 2012-08-24 09:01:35
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冻池

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

首先，配制胶的时候要把琼脂糖充分溶解，到溶液里没有琼脂糖了，核酸染料应该没有问题，脚的浓度再配大一点，拔梳子的时候注意点，不要把胶孔弄破了，直上直下的拔起来就应该没有问题，点样的时候不要上样太多，最好不要漫出点样孔，最后电泳时电压低一点，时间长一点，前面的显色液最多过了2/3胶板长度就可以了，感觉你跑胶时间也有点久，都有点模糊了。这样改进下应该就没有什么问题了，祝好运
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各位大侠多多赐教
9楼2012-08-27 19:51:53
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的胶用的多大浓度的？估计你的点样孔有点问题，或者你上样的时候把胶戳破了。
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2楼2012-08-24 09:21:44
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tapmun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

marker这样子，肯定跟跑胶有关，可能是琼脂糖的问题，或者电压，或者缓冲液
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业精于勤荒于嬉，行成于思而毁于随
3楼2012-08-24 09:47:15
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wyg888

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
自然_法则: 回帖置顶 2012-08-24 15:56:06
自然_法则: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-27 11:53:46
首先是胶的配制问题，从跑的带来看可能是由于配胶时各个原料没有混合均匀，导致胶的疏密不均。第二可能跟胶有关，尤其琼脂糖的质量问题。第三是由于跑胶是的电压问题，有的时候电压过高会出现这种情况。再就是一个重要原因是缓冲液也就是电极液的问题，我在做试验的时候也出现过这种问题，主要是因为电极液用的时间过长或者是里面掺了很多杂质。
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每天都有一个新的开始！
4楼2012-08-24 10:51:21
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