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自然_法则

银虫 (初入文坛)

[求助] 核酸电泳图

图中带1,2是同一种PCR产物,3,4也是同一种PCR产物,5是Marker2000,6,7是质粒的DNA 无果(没有加RNA酶)8是Marker10000。 我用的染料是Ultra Power 25ml胶里加入2.5ul 染料。求解释为什么条带不整齐 越往上条带越模糊 谢谢

核酸电泳图PCR产物
每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
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冻池

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

首先,配制胶的时候要把琼脂糖充分溶解,到溶液里没有琼脂糖了,核酸染料应该没有问题,脚的浓度再配大一点,拔梳子的时候注意点,不要把胶孔弄破了,直上直下的拔起来就应该没有问题,点样的时候不要上样太多,最好不要漫出点样孔,最后电泳时电压低一点,时间长一点,前面的显色液最多过了2/3胶板长度就可以了,感觉你跑胶时间也有点久,都有点模糊了。这样改进下应该就没有什么问题了,祝好运
各位大侠多多赐教
9楼2012-08-27 19:51:53
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huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的胶用的多大浓度的?估计你的点样孔有点问题,或者你上样的时候把胶戳破了。
2楼2012-08-24 09:21:44
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tapmun

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

marker这样子,肯定跟跑胶有关,可能是琼脂糖的问题,或者电压,或者缓冲液
业精于勤荒于嬉,行成于思而毁于随
3楼2012-08-24 09:47:15
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wyg888

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
自然_法则: 回帖置顶 2012-08-24 15:56:06
自然_法则: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-27 11:53:46
首先是胶的配制问题,从跑的带来看可能是由于配胶时各个原料没有混合均匀,导致胶的疏密不均。第二可能跟胶有关,尤其琼脂糖的质量问题。第三是由于跑胶是的电压问题,有的时候电压过高会出现这种情况。再就是一个重要原因是缓冲液也就是电极液的问题,我在做试验的时候也出现过这种问题,主要是因为电极液用的时间过长或者是里面掺了很多杂质。
每天都有一个新的开始!
4楼2012-08-24 10:51:21
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