24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zjt829

木虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1375.9
散金: 2936
红花: 2
帖子: 697
在线: 182.3小时
虫号: 632925
注册: 2008-10-22
性别: GG
专业: 环境污染化学

[求助] 电泳胶片原因分析，如图所示

SDS-page电泳跑出的结果如下，请大家帮忙分析一下原因吧，谢了~
蛋白：植物组织蛋白提取液（用tris-HCl的方法提的，然后直接与上样缓冲液混合之后上样）
最左边marker：170KD-10KD
请分析

12%分离胶+6%浓缩胶

[ Last edited by zjt829 on 2012-8-23 at 18:11 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车已经有9人回复
酰胺脱乙酰基已经有13人回复
博士延得我，科研能力直往上蹿已经有8人回复
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗已经有4人回复
有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福已经有10人回复
天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人）已经有5人回复
CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优已经有6人回复
面上项目申报已经有3人回复
遇见不省心的家人很难过已经有22人回复

淡泊志宁静远

1楼 2012-08-23 18:04:05

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

loop00

木虫 (小有名气)

阿凡达

BioEPI: 1
应助: 18 (小学生)
金币: 1553.3
散金: 15
红花: 2
帖子: 299
在线: 109.9小时
虫号: 466614
注册: 2007-11-24
性别: GG
专业: 生物信息学

【答案】应助回帖

我是专业做蛋白电泳的，在你的叙述里似乎做得没有问题，但是你的上样Buffer配的对了吗？这种图Marker正常，证明胶配的没问题，问题出在样品，样品都是蛋白，就算有多糖、DNA也不影响整体效果；
1、蛋白要提取出来：Tris提取液要加NaCl增加溶解性，加巯基乙醇保护蛋白，pH要合适，在中性，植物样品一定要加PVP去除酚类！！！研磨保持低温防止降解
2、Samplebuffer也就是蓝色的上样缓冲一定不能忘了加SDS！！！参看Takara配方你再仔细看看

强烈怀疑你没加SDS在样品缓冲，或者没有煮样；PVP也会是一个问题，谢谢