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zjt829

木虫 (正式写手)

[求助] 电泳胶片原因分析,如图所示

SDS-page电泳跑出的结果如下,请大家帮忙分析一下原因吧,谢了~
蛋白:植物组织蛋白提取液(用tris-HCl的方法提的,然后直接与上样缓冲液混合之后上样)
最左边marker:170KD-10KD
请分析

12%分离胶+6%浓缩胶

[ Last edited by zjt829 on 2012-8-23 at 18:11 ]
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淡泊志宁静远
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wenzonglu

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★
wizardfan: 金币+2, 新主意 2012-08-26 04:41:02
zjt829: 金币+3, 好的,多谢,糖酚之类都是如何去除,在不影响金属蛋白的情况 2012-08-26 10:43:20
先确定你目的蛋白的大致分子量,查其资料看看是否会跟多糖、多酚之类的物质结合,如果有结合实际分子量将大于理论值。然后不加标准条带先跑一次(参数不变,延长时间一个小时)看看是否能大致分开?就算看不出条带也没关系,只要能拉开蛋白。如果能拉开部分蛋白的话,根据你目的蛋白实际的分子量,使用透析袋处理(不贵,很多规格可以选的)。这个过程需要浓缩的话,使用真空冷冻干燥机,可以保证蛋白活性。
13楼2012-08-25 23:15:14
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zjt829

木虫 (正式写手)

为什么没人来回答呢
淡泊志宁静远
2楼2012-08-23 20:37:10
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zjt829: 金币+2 2012-08-24 10:54:22
似乎提取效果不佳啊,都拖尾了。此外,楼主你的胶哪是上哪是下啊?
3楼2012-08-23 22:58:38
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wizardfan

至尊木虫 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zjt829: 金币+2, 说错了,右边的是marker,呵呵,样品没提好??? 2012-08-24 10:55:01
同意楼上的,看上去最右边的是marker,分离得很清晰,而不像楼主说的左边是marker。
4楼2012-08-24 00:35:28
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